大鼠SERCA2a启动子虫荧光素酶质粒的构建、鉴定和转染
CONSTRUCTION, IDENTIFICATION AND TRANSFECTION OF PLASMID pGL3-SERCA2a PROMOTER
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摘要: 目的构建大鼠SERCA2a启动子-虫荧光素酶质粒,并进行鉴定和转染检测.方法 PCR法扩增出含SERCA2a启动子基因的DNA大片段,经pGEM-T esay载体连接后酶切获得目的基因,亚克隆到pGL3-Basic载体中;酶切及测序鉴定;用Lipofectin Reagent转染到心肌细胞中,细胞培养后裂解并作荧光检测.结果构建出了含虫荧光素酶基因的质粒,酶切及测序鉴定插入子为大鼠SERCA2a启动子,转染细胞后检测到荧光.结论成功构建了大鼠SERCA2a启动子-虫荧光素酶质粒,为SERCA2a基因调控等研究提供了工具和基础.