利用周期性静水压在水力聚焦生物反应器中构建组织工程软骨

Construction of tissue-engineered cartilage in hydrodynamic focusing bioreactor under cyclic hydrostatic pressure

摘要: 目的探讨在水力聚焦生物反应器(HFB)中加载周期性静水压构建组织工程软骨.方法分离培养兔关节软骨细胞并接种到PLGA支架上,细胞支架复合物分为加载周期性静水压的实验组和不加压的对照组,加压组的条件为:频率0.1 Hz,压力0～200 kPa, 每天加压8 h, 两组均在HFB生物反应器中培养2周,利用免疫组织化学、RT-PCR、生物化学等方法观察周期性静水压对HFB生物反应器中构建的组织工程软骨的影响.结果免疫组织化学显示加压组的Ⅱ型胶原和甲苯胺蓝的染色面积明显大于对照组(P<0.001).RT-PCR显示加压组的Ⅱ型胶原、聚合素的表达高于对照组(P<0.001), 但Ⅰ型胶原的表达低于对照组(P<0.05).生物化学定量检测显示加压组的总胶原和糖胺多糖(GAG)的含量显著高于对照组(P<0.001).结论周期性静水压对HFB生物反应器中构建的组织工程软骨具有显著的促进促进作用,并且稳定了软骨细胞的表型.