基于CD107a标记流式细胞仪检测NK细胞毒性方法的建立

Detection of NK cell cytotoxicity with CD107a antibody labeling by Flow Cytometry

摘要: 目的建立基于CD107a标记、利用流式细胞仪检测NK细胞毒性的方法.方法首先将外周血单个核细胞(PBMCs)与K562细胞以3∶1比例混合, 2 h后加入莫能菌素, 1.5 h后加入CD107a和CD56标记抗体,流式细胞仪分析CD107a阳性细胞的频率.其次观察CD107a抗体孵育时间、不同效靶比例对CD107a阳性细胞检测的影响.最后观察该方法与传统LDH释放法检测NK细胞毒活性的一致性.结果 NK细胞活化后可在其表面检测到高水平表达的CD107a分子,效靶细胞孵育结束后加入CD107a抗体可降低检测背景,低效靶比例同样具有检测敏感性.该方法与LDH释放法的检测结果一致.结论利用CD107a抗体标记检测NK细胞毒活性的方法具有快速、敏感、所需效应细胞少的优点.