摘要: 目的 应用无血清培养基( SFM)悬浮法培养人结肠癌细胞,筛选和鉴定人结肠癌细胞中肿瘤干细胞相关亚群,并对其进行干预.方法 取新鲜的结肠癌肿瘤组织进行原代培养,分离获得的原代结肠癌细胞在SFM中形成肿瘤干细胞球,而在含血清培养基( SSM)中则为贴壁生长.用5-氟尿嘧啶(5 - Fu)对筛选获得的肿瘤干细胞球进行干预,检测侧群细胞(SP)比例、细胞克隆形成能力、正常肠道干细胞标记物Musashi -1表达及结肠癌干细胞特异性标记物CD133的表达.结果 原代培养获得的人结肠癌细胞能够在SFM中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球,肿瘤干细胞球的SP细胞含量高、克隆形成率高,且Mushashi -1及CD133的表达均较高,5- Fu对其抑制率较低.经5- Fu干预后,结肠癌肿瘤干细胞球中SP细胞比例增加、Musashi -1及CD133表达增加,克隆形成率无明显差异.结论 SFM的培养法可从人结肠癌细胞中分离获得极少量肿瘤干细胞球,5-Fu干预可再次富集该细胞亚群中的肿瘤干细胞.