负载pcDNA3.1-EGFP壳聚糖纳米颗粒的制备及其生物学特性分析

Generation and characterization of a pcDNA3.1-EGFP plasmid delivery system based on chitosan-nanoparticles

摘要: 目的制备并鉴定负载pcDNA3.1-EGFP质粒的纳米颗粒,观察其细胞转染效率及细胞毒性.方法首先将壳聚糖和质粒DNA按不同质量比混合,制备成纳米颗粒,计算其包封率,测定其粒径和Zeta电位.其次分别将纳米颗粒与RAW264.7和CT-26细胞孵育,荧光显微镜观察2两种细胞内绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测荧光细胞的频率.最后利用MTS/PMS法检测纳米颗粒对RAW264.7和CT-26细胞的毒性.结果质粒DNA被壳聚糖纳米颗粒高效负载,粒径分布在100～300 nm之间,携带正电荷,被哺乳动物细胞有效摄取并表达,对细胞没有明显毒性.结论负载DNA的壳聚糖纳米颗粒可用于重组基因疫苗的运送,可用于疾病的预防或治疗.