Effects of EGFR interference on activation of astrocytes after intra-cerebral hemorrhage and its mechanism
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摘要: 目的 观察干扰表皮生长因子受体(EGFR)表达对脑出血后星形胶质细胞活化的影响.方法 注射Ⅶ型胶原酶制备脑出血模型大鼠,同时设置假手术组作为对照.术后7d,行神经功能评分判断造模成功与否.取脑出血模型大鼠和假手术大鼠,行SP免疫组化法检测脑组织EGFR和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达.分离新生大鼠皮层星形胶质细胞,体外培养.观察干扰EGFR表达对细胞的影响,实验分4组:① 对照组:不处理;② 重组大鼠睫状神经营养因子(CNTF)组:加入20 μg/L CNTF;③ 阴性组:加入20 μg/L CNTF,并转染EGFR siRNA阴性对照;④ EGFR组:加入20 μg/L CNTF,并转染EGFR siRNA.采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组细胞EGFR、GFAP、磷酸化酪胺酸激酶JAK1(p-JAK1)、磷酸化信号传导与转录激活因子3(p-STAT3)的表达.结果 脑出血模型大鼠造模成功率89.5%(17/19).脑出血模型大鼠脑组织EGFR和GFAP表达显著高于假手术组(P<0.05).EGFR组EGFR mRNA和蛋白相对表达量显著低于对照组、CNTF组和阴性组(P<0.05).CNTF组和阴性组GFAP mRNA和蛋白相对表达量显著高于对照组和EGFR组(P<0.05),而对照组和EGFR组比较无显著差异(P>0.05).CNTF组和阴性组p-JAK1和p-STAT3蛋白相对表达量显著高于对照组和EGFR组(P<0.05),而对照组和EGFR组比较无显著差异(P>0.05).结论 脑出血大鼠EGFR和GFAP表达升高,星形胶质细胞活化.干扰EGFR表达可抑制大鼠星形胶质细胞活化,其机制可能与阻滞JAK1和STAT3磷酸化有关.
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关键词:
- 表皮生长因子 /
- 神经胶质纤维酸性蛋白 /
- 磷酸化酪胺酸激酶JAK1 /
- 磷酸化信号传导与转录激活因子3 /
- 星形胶质细胞
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