Effect of onlays made by CEREC system in root canal repair of posterior tooth defect
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摘要:目的 探讨瓷睿刻(CEREC)系统制作的高嵌体在后牙牙体缺损修复根管治疗中的效果。方法 将100例(100颗牙)后牙牙体缺损患者随机分为CEREC组和Ceramage组，每组50例。Ceramage组采用Ceramage聚合瓷高嵌体治疗，CEREC组采用CEREC高嵌体治疗。比较2组修复后即刻的满意度，修复后即刻和修复后1年的修复效果。结果 修复后即刻，2组对修复体舒适度、治疗次数和时间、修复体外形、修复体颜色等满意度比较差异无统计学意义(P>0.05)。修复后即刻及修复后1年，CEREC组修复体颜色成功率高于Ceramage组，差异有统计学意义(P < 0.05)，2组牙周状态成功率、边缘密合成功率、牙齿完整成功率、继发龋成功率、修复体固位成功率、边缘着色成功率和表面磨耗成功率等比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在后牙牙体缺损修复根管治疗中，CEREC高嵌体和Ceramage聚合瓷高嵌体的修复效果均较好，但CEREC高嵌体在修复体颜色上的优势比较明显。Abstract:Objective To explore the effect of onlays made by Chairside Economical Restoration of Esthetic Ceramics (CEREC) system in root canal repair of posterior tooth defect.Methods Totally 100 patients (100 teeth) with posterior tooth defect were randomly divided into CEREC group and Ceramage group, with 50 cases in each group. The Ceramage group was treated with Ceramage polymerized porcelain onlays, and the CEREC group was treated with CEREC onlays. The satisfaction degree at immediate time point after repair, the repair effect at immediate time point after repair and one year after repair were compared between the two groups.Results At immediate time point after restoration, there were no significant differences in the satisfaction degrees of prosthesis comfort, times and duration of treatment, prosthesis shape and color of prosthesis between the two groups (P>0.05). At immediate time point after restoration and one year after restoration, the success rate of restoration color in the CEREC group was significantly higher than that in the Ceramage group (P < 0.05). There were no significant differences in the success rate of periodontal status, edge closure, tooth integrity, secondary caries, retention, edge coloring and surface abrasion between the two groups (P>0.05).Conclusion In the root canal repair of posterior teeth defect, CEREC onlays and Ceramage polymerized porcelain onlays have better restoration effect, but CEREC onlays have obvious advantages in the color of the restoration.
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Keywords:
- tooth defect /
- root canal therapy /
- repair /
- onlays /
- effect
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结直肠癌(CRC)是较为常见的恶性肿瘤之一，患者5年生存率仅为47.2%[1]。CRC的预后与早期诊治密切相关，早期诊治的CRC患者的5年生存率可高达90%, 而晚期诊治的CRC患者的5年生存率不足10%[2]。研究[3-4]显示外周血Septin 9甲基化状态在CRC发生的极早期就会发生变化，或可作为CRC早期筛查的分子标志物。本研究检测了120例CRC患者外周血中Septin 9甲基化状态，分析外周血中Septin 9甲基化与CRC的关系，现将结果报告如下。
1. 资料与方法
1.1 一般资料
分析2017年1月—2019年12月在西南医院体检中心体检并接受Septin 9筛查的人群1 586例。另选取2017年1月—2018年12月120例CRC者，其中男84例，女36例，平均年龄(57.1±12.2)岁，均采集样本并进行Septin 9甲基化、癌胚抗原(CEA)和糖链抗原199(CA199)检测。纳入标准: ①接受结肠镜检查的患者; ②年龄>18岁者。排除标准: ①既往有恶性肿瘤病史的患者; ②曾接受放化疗的患者; ③既往有腹部手术史的患者; ④妊娠期女性。
1.2 Septin 9甲基化状态、CEA及CA199检测
采集受试者外周静脉血10 mL置于EDTA抗凝真空采血管中, 1 500转/min离心15 min, 分离血清和血浆，保存于-80 ℃环境中并在4周内完成检测。Septin 9甲基化检查过程参照大肠癌甲基化基因检测试剂盒(PCR荧光探针法)说明书，采用伯乐实时荧光定量PCR仪完成检测，血清CEA、CA199采用电化学发光法检测，均由本院检验科完成。
1.3 外泌体分离
将血清置于无菌操作台中融化，按1∶ 1体积加入外泌体沉淀试剂盒(赛默飞)，置于翻转摇床上4 ℃孵育过夜，次日以12 000 g离心60 min, 收集白色沉淀，采用100 μL无菌PBS溶解，测定蛋白浓度并将外泌体稀释到1 mg/mL待用。
1.4 体外实验
1.4.1 细胞培养
Saos2细胞培养于由90%的DMEM培养基、10%FBS及1%双抗组成的培养基中。待细胞融合度达到约90%时，采用胰酶消化细胞，并进行传代。
1.4.2 免疫蛋白印迹(Western blot)
外泌体采用RIPA裂解液于冰上进行提取，采用BCA试剂盒测定蛋白浓度后，按照50 μg的剂量将蛋白样品加到10%的SDS-page中进行电泳; 电泳后进行转膜，而后将膜用5%的脱脂牛奶进行封闭室温孵育1 h, 一抗工作液4 ℃孵育过夜，洗膜后孵育相应的二抗工作，然后采用化学发光试剂盒检测杂交信号。
1.4.3 CCK-8法检测细胞增殖
消化细胞并进行细胞计数，而后按照5 000个/孔的密度将细胞种植于96孔板中，待细胞贴牢后(6 h), 换为含有20 μg/mL外泌体的培养基(对照组为含有相应体积PBS的培养基)，置于37 ℃培养箱中继续培养。分别在处理后24、48、72 h向培养基中加入10 μL CCK-8溶液，将其置于37 ℃培养箱中继续培养90 min, 而后采用酶标仪检测450 nm处的吸光度。
1.4.4 流式细胞术检测细胞凋亡
外泌体处理细胞48 h后，采用0.25%胰酶消化细胞，血清中止，收集细胞, PBS重悬后按照Annexin V-FITC/PI试剂盒相关说明进行Annein V和PI染色，然后上机检测，随后应用FlowJo7.6进行数据分析。
1.5 统计学分析
采用SPSS 24.0进行统计分析，组间比较采用t检验，组间率的比较采用χ2检验，总样本不同诊断方式采用受试者工作特征(ROC)曲线分析, P < 0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 1 586例体检者的Septin 9阳性率
共计1 586例体检者接受了Septin 9筛查，其中男1 023例，女563例; Seprtin 9甲基化阳性56例，阳性率为3.5%; 56例Septin 9阳性者中癌前病变1例，而Septin 9阴性者中未见癌变或癌前病变。Sepetin 9阳性者中，胃肠状态异常者(肠胃炎症或者息肉等)20例(35.7%), 而Septin 9阴性者胃肠状态异常率仅为5.4%(83/1 530), 提示Septin 9在外周血中的甲基化状态与受试者胃肠状态密切相关，可能与癌前病变相关。见表 1。
表 1 1 586例正常人群Septin 9甲基化与胃肠状态的相关性指标 分类 Septin 9甲基化状态 阳性(n=56) 阴性(n=1 530) 性别 男 43 982 女 13 548 胃肠状态 正常 36 1 447 异常 20 83 2.2 120例CRC患者外周血Septin 9甲基化状态监测结果
120例CRC患者中, Septin 9甲基化阳性者93例，平均年龄(59.1±12.8)岁; Septin 9甲基化阴性者27例，平均年龄(53.1±10.2)岁; CRC在年龄较高人群中更易感，但与性别无关。120例CRC患者中, Septin 9甲基化阳性率为78.4%(73/93); 在不同性别、不同年龄的比较中, CRC患者外周血Septin 9甲基化阳性率的差异无统计学意义(P=0.635、0.149); 在不同分化程度的比较中，高分化、中分化、低分化CRC患者的Septin 9甲基化阳性率依次为52.6%(10/19)、79.7%(59/74)、88.9%(24/27), 低分化CRC患者外周血Septin 9甲基化阳性率高于高分化组，差异有统计学意义(P=0.006)。见表 2。
表 2 CRC患者Septin 9检测情况[n(%)]指标 分类 Septin 9阳性(n=93) Septin 9阴性(n=27) 性别 男 67(79.8) 17(20.2) 女 26(72.2) 10(27.8) 年龄 ≤60岁 51(71.8) 20(28.2) >60岁 42(85.7) 7(14.3) 分化程度 高分化 10(52.6)** 9(47.4) 中分化 59(79.7) 15(20.3) 低分化 24(88.9) 3(11.1) 低分化比较, ** P < 0.01。 2.3 CRC患者外周血Septin 9甲基化以及CEA、CA199蛋白检测结果
本研究结果显示，与CA199、CEA相比，外周血Septin 9甲基化的灵敏度为72.3%, 特异度为92.5%, 均优于CEA和CA199的灵敏度和特异度，见表 3、图 1。
表 3 CRC患者Septin 9、CEA、CA199的灵敏度和特异度比较指标 灵敏度(95%CI) 特异度(95%CI) 曲线下面积 Septin 9 72.3(60.5~80.5) 92.5(75.5~95.5) 0.87 CEA 42.2(32.2~55.6) 75.0(65.5~87.5) 0.59 CA199 20.5(12.1~27.1) 45.0(37.7~55.5) 0.24 2.4 血清外泌体中Septin 9的表达及甲基化状态
本研究分别提取了正常健康人群和CRC患者外周血的血清外泌体，并以外泌体标志物CD63进行鉴定。结果显示，提取的样本中存在大量外泌体, Western blot结果显示CRC患者外泌体中Septin 9表达较正常人群降低，外泌体中Septin 9甲基化水平也较正常人群上升，差异均有统计学意义(P=0.009、0.003)。见图 2。
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图 2 CRC患者血清外泌体中Septin 9表达及甲基化状态A: Western Blot检测外泌体标志物CD63; B: Western Blot检测外泌体中Septin 9表达; C: 特异性甲基化PCR检测外泌体中Septin 9甲基化状态。与正常人群相比, **P<0.01; 与CRC相比, ##P < 0.01。2.5 CRC患者血清外泌体对CRC细胞Saos2增殖、凋亡的影响
本研究将提取的外泌体以20 μg/mL的水平来处理CRC细胞系Saos2, 测定细胞增殖和凋亡情况。结果显示, CRC患者血清外泌体可促进细胞增殖，对细胞凋亡有抑制作用，差异有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)，表明CRC患者血清外泌体与CRC细胞增殖和凋亡密切相关。见图 3。
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图 3 CRC患者血清外泌体对CRC细胞系Saos2增殖和凋亡的影响A: CCK-8检测CRC血清外泌体对细胞增殖的影响; B: 流式法检测CRC患者血清外泌体对细胞凋亡的影响。两者比较, **P < 0.01。3. 讨论
目前, CRC的早期诊断主要借助侵入式的结肠镜，但患者的依从性较低[5]; 粪便潜血检测有助于筛选高危人群，但易出现假阳性或假阴性，需要反复送检，导致患者依从性也较低。Septin 9是一个高度保守的GTP结合蛋白，广泛存在于人类细胞中，其基因位于长染色体17q25.3, 研究[6]显示Septin 9甲基化在CRC及部分癌前病变患者外周血中有较高的检出率。
Septin 9甲基化可出现在各期CRC中，阳性率不受患者性别、年龄、病变部位的影响; CRC患者的外周血Septin 9甲基化水平与癌症分期呈正相关，即Ⅳ期患者外周血Septin 9甲基化水平显著高于Ⅰ~Ⅲ期，但Septin 9甲基化阳性率与肿瘤分化程度无关[7]。YANG J K等[8]及陈培等[9]认为，不同病理分期CRC患者的Septin 9甲基化阳性率差异无统计学意义(P>0.05), 而本研究发现CRC患者外周血Septin 9甲基化与疾病分化程度相关，外周血Septin 9甲基化检测的灵敏度及特异度均优于传统肿瘤标志物CEA及CA199。本研究认为对外周血中Septin 9甲基化的检测要考虑受试人群存在人种差异，亚洲人群外周血Septin 9甲基化或可是更好的CRC早期筛查标志物。
外泌体是细胞分泌的一种具有磷脂双分子层的微小囊泡，其直径多在30~200 nm[10], 并广泛分布于人体内，可以传递包括蛋白、RNA和DNA等多种物质。外泌体被用于多种疾病的诊断[11], 在CRC中也有作为分子标志物的报道[12]。本研究证实外周血中Septin 9甲基化状态可作为CRC的分子标志。外泌体的内容物是经过母体细胞精密调节、高度选择的结果，携带其来源母体细胞的特性[13]。外泌体能将各种细胞因子、转录因子、蛋白质和染色质传递给间质细胞、内皮细胞、炎症细胞和免疫细胞等受体细胞，在肿瘤微环境调节、肿瘤细胞与正常细胞及肿瘤细胞间信息传递中发挥重要作用[14-16]。本研究结果表明, CRC患者血清外泌体中Septin 9表达降低，甲基化水平升高, CRC患者血清外泌体能显著促进Saos2细胞增殖。
综上所述, Septin 9可作为CRC早期筛查的标志物, CRC患者血清外泌体诱导的CRC增殖、凋亡抵抗可能是Septin 9的作用机制。
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表 1 2组修复后即刻满意度比较[n(%)]
项目 组别 n 不满意 较满意 很满意 总满意 修复体舒适度 Ceramage组 50 3(6.0) 14(28.0) 33(66.0) 47(94.0) CEREC组 50 2(4.0) 14(28.0) 34(68.0) 48(98.0) 治疗次数和时间 Ceramage组 50 4(8.0) 18(36.0) 28(56.0) 46(92.0) CEREC组 50 3(60.0) 17(34.0) 30(60.0) 47(94.0) 修复体外形 Ceramage组 50 5(10.0) 19(38.0) 26(52.0) 45(90.0) CEREC组 50 4(8.0) 16(32.0) 30(60.0) 46(92.0) 修复体颜色 Ceramage组 50 8(16.0) 15(30.0) 27(54.0) 42(84.0) CEREC组 50 5(10.0) 17(34.0) 28(56.0) 45(90.0) 
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表 2 修复后即刻的修复效果比较[n(%)]
项目 Ceramage组(n=50) CEREC组(n=50) A级 B级 C级 A级 B级 C级 牙周状态 50(100.0) 0 0 50(100.0) 0 0 边缘密合 50(100.0) 0 0 50(100.0) 0 0 牙齿完整 50(100.0) 0 0 50(100.0) 0 0 继发龋 50(100.0) 0 0 50(100.0) 0 0 修复体固位 50(100.0) 0 0 49(98.0) 1(2.0) 0 边缘着色 50(100.0) 0 0 50(100.0) 0 0 修复体颜色 40(80.0) 10(20.0) 0 47(94.0)* 3(6.0) 0 表面磨耗 50(100.0) 0 0 50(100.0) 0 0 与Ceramage组比较, * P < 0.05。
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表 3 2组修复后1年的修复效果比较[n(%)]
项目 Ceramage组(n=50) CEREC组(n=50) A级 B级 C级 A级 B级 C级 牙周状态 47(94.0) 3(6.0) 0 49(98.0) 1(2.0) 0 边缘密合 50(100.0) 0 0 50(100.0) 0 0 牙齿完整 50(100.0) 0 0 49(98.0) 1(2.0) 0 继发龋 50(100.0) 0 0 48(96.0) 2(4.0) 0 修复体固位 50(100.0) 0 0 49(98.0) 1(2.0) 0 边缘着色 47(94.0) 3(6.0) 0 47(94.0) 3(6.0) 0 修复体颜色 41(82.0) 9(18.0) 0 48(96.0) 2(4.0)* 0 表面磨耗 50(100.0) 0 0 50(100.0) 0 0 与Ceramage组比较, * P < 0.05。
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[1] LU T, PENG L, XIONG F, et al. A 3-year clinical evaluation of endodontically treated posterior teeth restored with two different materials using the CEREC AC chair-side system[J]. J Prosthet Dent, 2018, 119(3): 363-368. doi: 10.1016/j.prosdent.2017.04.022
[2] 张立娜. CEREC AC椅旁系统对冠部修复患者基牙牙周组织的影响[J]. 医疗装备, 2020, 33(9): 78-79, 83. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YLZB202009042.htm [3] 郑宝强. CEREC AC全瓷修复系统在牙体缺损修复中的应用[J]. 中国医疗器械信息, 2020, 26(2): 26-27. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZGQX202002014.htm [4] BOHNER L O, NETO P T, AHMED A S, et al. CEREC chairside system to register and design the occlusion in restorative dentistry: a systematic literature review[J]. J Esthet Restor Dent, 2016, 28(4): 208-220. doi: 10.1111/jerd.12226
[5] 李蕴聪, 陈璐, 瞿黎阳, 等. CEREC数字化椅旁修复与传统热压铸技术在全瓷髓腔固位冠修复中的临床效果比较[J]. 临床口腔医学杂志, 2019, 35(6): 346-351. doi: 10.3969/j.issn.1003-1634.2019.06.008 [6] 陈薇, 刘学军, 华莹. CEREC 3D瓷嵌体治疗牙体缺损所致食物嵌塞的临床效果[J]. 包头医学院学报, 2019, 35(7): 58-59. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-BTYX201907024.htm [7] 郭晓钰, 陈慧芬, 徐秀清, 等. CEREC口腔椅旁CAD/CAM数字化修复临床疗效及常见术后并发症浅析[J]. 口腔医学, 2018, 38(10): 947-950. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-KQYX201810023.htm [8] SCHNEIDER O. Long-term Cerec 3D chairside bridges milled from IPS e. max CAD LT blocks[J]. Int J Comput Dent, 2016, 19(3): 239-255. http://europepmc.org/abstract/MED/27644181
[9] 张捷. CEREC椅旁CAD-CAM技术修复活髓牙牙体缺损的护理配合[J]. 现代养生: 下半月版, 2018(12): 189-190. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YSXD201824127.htm [10] 江辉, 曾利伟, 邓璐, 等. 牙齿磨耗程度对Cerec光学印模咬合接触精确性影响的研究[J]. 口腔医学研究, 2018, 34(8): 885-888. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-KQYZ201808029.htm [11] 李永硕, 汲平. 临床应用CEREC全瓷嵌体对牙体大面积缺损固位力欠佳的磨牙残冠的临床修复效果观察[J]. 全科口腔医学电子杂志, 2018, 5(14): 39-40. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-QKKQ201814021.htm [12] 武金强, 王士成, 王蓓. Ceramage聚合瓷高嵌体与瓷睿刻二硅酸锂玻璃陶瓷高嵌体在后牙根管治疗后大面积缺损修复中的应用比较[J]. 中国美容医学, 2018, 27(2): 113-116. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-MRYX201802039.htm [13] 朱红玲, 耿文韬, 谢金芳, 等. CAD/CAM修复体修复老年人后牙缺损的临床效果评价[J]. 吉林大学学报: 医学版, 2018, 44(1): 157-161. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-BQEB201801030.htm [14] 田斌, 曹文瑾, 杨晓林. 椅旁CAD/CAM系统制作玻璃陶瓷高嵌体修复后牙牙体大面积缺损的效果[J]. 宁夏医科大学学报, 2017, 39(6): 705-707. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-XNXY201706026.htm [15] 陈一怀. CEREC椅旁CAD/CAM高嵌体修复后牙牙体缺损的临床研究[J]. 世界临床医学, 2017, 11(18): 163-165. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-BQEB201304038.htm
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