Effect of budesonide formoterol powder inhalation combined with spleen aminopeptide in treatment of patients with acute attack of bronchial asthma
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摘要:目的 观察布地奈德福莫特罗粉吸入剂联合脾氨肽治疗支气管哮喘急性发作的效果。方法 将98例支气管哮喘急性发作患者随机分为对照组和研究组，每组49例。对照组给予布地奈德福莫特罗治疗，研究组给予布地奈德福莫特罗联合脾氨肽治疗。比较2组症状改善情况、肺功能指标[第1秒用力呼气量（FEV1）、第1秒用力呼气量与肺活量的比值（FEV1/FVC）、晨间测定最大呼气峰值流速（PEFam）、晚间测定最大呼气峰值流速（PEFpm）]、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2（Th1/Th2）漂移状况及微小RNA-146a（miR-146a）表达水平。结果 研究组憋喘、咳嗽、哮鸣音、湿啰音症状改善时间均短于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。治疗后，2组FEV1、FEV1/FVC、PEFam、PEFpm均高于治疗前，且研究组FEV1、FEV1/FVC、PEFam、PEFpm均高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。治疗后，2组白细胞介素-2（IL-2）、γ-干扰素（IFN-γ）、Th1、Th1/Th2均高于治疗前，白细胞介素-5（IL-5）、白细胞介素-13（IL-13）、Th2均低于治疗前，且研究组IL-2、IFN-γ、Th1、Th1/Th2均高于对照组，IL-5、IL-13、Th2均低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。治疗后，2组miR-146a表达水平均低于治疗前，且研究组miR-146a表达水平低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 布地奈德福莫特罗联合脾氨肽治疗支气管哮喘急性发作效果显著，能加快症状缓解，改善肺功能，其机制可能与逆转Th1/Th2漂移方向、下调miR-146a表达水平有关。Abstract:Objective To observe the effect of budesonide formoterol powder inhalation combined with spleen aminopeptide in treatment of patients with acute attack of bronchial asthma.Methods A total of 98 patients with acute attack of bronchial asthma were randomly divided into control group and study group, with 49 cases in each group. The control group was treated with budesonide formoterol, while the study group was treated with budesonide formoterol and spleen aminopeptide. Improvement of symptoms, lung function indexes[forced expiratory volume in the first second (FEV1), ratio of forced expiratory volume in the first second to forced vital capacity (FEV1/FVC), maximum peak expiratory flow rate in the morning (PEFam) and maximum peak expiratory flow rate in the evening (PEFpm)], helper T cell 1/helper T cell 2(Th1/Th2) drift and microRNA-146a (miR-146a) expression level were compared between the two groups.Results The improvement time of symptoms such as asthma, cough, wheezing and wet rale in the study group was significantly shorter than that in the control group (P < 0.05). After treatment, FEV1, FEV1/FVC, PEFam and PEFpm in both groups were significantly higher than those before treatment, and FEV1, FEV1/FVC, PEFam and PEFpm in the study group were significantly higher than those in the control group (P < 0.05). After treatment, interleukin-2 (IL-2), interferon-γ (IFN-γ), Th1 and Th1/Th2 increased significantly, while interleukin-5 (IL-5), interleukin-13 (IL-13) and Th2 decreased significantly in both groups, and IL-2, IFN-γ, Th1 and Th1/Th2 in the study group were significantly higher than those in the control group, while IL-5, IL-13 and Th2 were significantly lower than those in the control group (P < 0.05). After treatment, the expression level of miR-146a in both groups was significantly lower than that before treatment, and the expression level of miR-146a in the study group was significantly lower than that in the control group (P < 0.05).Conclusion Budesonide formoterol combined with spleen aminopeptide has a significant effect in the treatment of patients with acute attack of bronchial asthma, which can accelerate the remission of symptoms and improve lung function, and its mechanism may be related to reversing the drift direction of Th1/Th2 and down-regulating the expression level of miR-146a.
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Keywords:
- budesonide formoterol /
- spleen aminopeptide /
- bronchial asthma /
- acute attack /
- helper T cells /
- microRNA
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支气管哮喘是呼吸内科常见的慢性气道炎症疾病，发病率、病死率均较高，特征为气道高反应性、可逆性气流受限[1]。支气管哮喘的治疗需根据病程分期(急性发作期、稳定期等)采取相应的方案[2-3]。目前，支气管哮喘多采用多药物联合治疗方案。布地奈德福莫特罗是复合型制剂，包含布地奈德、富马酸福莫特罗两种成分，分别属于糖皮质激素、β2受体激动剂，具有支气管舒张与抗炎的双重效应[4]。脾氨肽是免疫调节剂，具有双向免疫调节作用[5]。本研究观察布地奈德福莫特罗联合脾氨肽治疗支气管哮喘急性发作的效果，现报告如下。
1. 资料与方法
1.1 一般资料
选择2018年5月—2020年5月本院收治的支气管哮喘急性发作患者98例为研究对象，依据随机数字表法分为对照组和研究组，每组49例。对照组男27例，女22例，年龄20~69岁，平均(49.32±9.52)岁，病程1~28年，平均(11.82±5.11)年，急性发作时病情严重程度分级[6]为轻度14例，中度35例。研究组男28例，女21例，年龄21~70岁，平均(49.28±9.47)岁，病程1~27年，平均(11.78±5.07)年，急性发作时病情严重程度分级[6]为轻度17例，中度32例。2组患者一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05), 具有可比性。本研究获得本院伦理委员会批准。
纳入标准: ①符合支气管哮喘诊断标准[6], 且处于急性发作期者; ②具备正常表达能力，未患有精神疾病者; ③对本研究知情，已签署同意书者。排除标准: ①原发性心、肝、肺、脑等脏器疾病者; ②患有其他呼吸系统疾病者; ③先天性免疫缺陷、合并免疫系统相关疾病、恶性肿瘤者; ④妊娠期、哺乳期女性患者; ⑤过敏体质者。
1.2 方法
2组均予以止咳、化痰、平喘等常规治疗。对照组给予布地奈德福莫特罗(AstraZeneca AB, 批准文号H20140458)治疗, 1吸/次, 2次/d。研究组给予布地奈德福莫特罗联合脾氨肽(北京第一生物化学药业有限公司，国药准字H10950310)治疗，布地奈德福莫特罗用法、用量与对照组相同，脾氨肽口服, 1支/d。2组疗程均为4周。
1.3 观察指标
① 症状改善情况。统计2组患者治疗后憋喘、咳嗽、哮鸣音、湿啰音症状的改善时间。②肺功能指标。选择第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气量与肺活量的比值(FEV1/FVC)、晨间测定最大呼气峰值流速(PEFam)、晚间测定最大呼气峰值流速(PEFpm)这4项肺功能指标，采用微型医用肺功能仪(Microloop-Ⅱ型，英国迈科)测定，时间点为治疗前及治疗后。③辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(Th1/Th2)漂移状况。Th1/Th2漂移状况的评价指标包括白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-13(IL-13)、Th1、Th2、Th1/Th2。治疗前及治疗后，采集患者清晨空腹状态下静脉血5 mL, 3 000转/min离心10 min, 分离血清，低温保存。采用酶联免疫吸附试验测定IL-2、IFN-γ、IL-5、IL-13水平。取全血1 mL, 采用流式细胞仪(型号CytomicsTM FC 500, 美国贝克曼库尔特)测定Th1、Th2, 计算Th1/Th2。④微小RNA-146a(miR-146a)表达水平。治疗前及治疗后，采集患者清晨空腹状态下静脉血3 mL，留存血清标本，采用荧光定量PCR法测定miR-146a表达水平。
1.4 统计学方法
采用SPSS 23.0统计软件进行数据分析。符合正态分布的计量资料采用(x±s)表示，组间比较行独立样本t检验，组内比较行配对样本t检验; 计数资料采用[n(%)]表示，组间比较行χ2检验。检验水准α=0.05, P < 0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 2组症状改善情况比较
研究组憋喘、咳嗽、哮鸣音、湿啰音症状改善时间均短于对照组，差异有统计学意义(P < 0.01)。见表 1。
表 1 2组症状改善情况比较(x±s)d 组别 n 憋喘 咳嗽 哮鸣音 湿啰音 对照组 49 3.46±1.07 7.98±1.32 6.11±1.52 6.42±1.88 研究组 49 1.92±0.62** 5.29±1.73** 4.19±1.28** 4.49±1.27** 与对照组比较, **P < 0.01。 2.2 2组肺功能指标比较
治疗前, 2组FEV1、FEV1/FVC、PEFam、PEFpm比较，差异无统计学意义(P>0.05); 治疗后, 2组FEV1、FEV1/FVC、PEFam、PEFpm均高于治疗前，且研究组FEV1、FEV1/FVC、PEFam、PEFpm均高于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 2。
表 2 2组肺功能指标比较(x±s)组别 时点 FEV1/L FEV1/FVC/% PEFam/(L/min) PEFpm/(L/min) 对照组(n=49) 治疗前 1.46±0.43 64.46±5.63 203.43±10.19 40.32±6.35 治疗后 1.75±0.49* 67.72±7.11* 259.65±16.48* 283.45±16.33* 研究组(n=49) 治疗前 1.42±0.39 64.39±5.57 203.38±10.14 40.36±6.41 治疗后 1.97±0.55*# 71.48±8.12*# 297.02±19.68*# 311.12±24.17*# FEV1: 第1秒用力呼气量; FEV1/FVC: 第1秒用力呼气量与肺活量的比值; PEFam: 晨间测定最大呼气峰值流速;
PEFpm: 晚间测定最大呼气峰值流速。与治疗前比较, *P < 0.05; 与对照组比较, #P < 0.05。2.3 2组Th1/Th2漂移状况比较
治疗前, 2组IL-2、IFN-γ、IL-5、IL-13、Th1、Th2、Th1/Th2比较，差异无统计学意义(P>0.05); 治疗后, 2组IL-2、IFN-γ、Th1、Th1/Th2均高于治疗前, IL-5、IL-13、Th2均低于治疗前，且研究组IL-2、IFN-γ、Th1、Th1/Th2均高于对照组，IL-5、IL-13、Th2均低于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 3。
表 3 2组Th1/Th2漂移状况比较(x±s)组别 时点 IL-2/(pg/mL) IFN-γ/(ng/mL) IL-5/(pg/mL) IL-13/(pg/mL) Th1/% Th2/% Th1/Th2 对照组(n=49) 治疗前 35.56±3.59 1.19±0.21 86.19±10.18 124.24±14.23 8.69±0.98 16.31±1.43 0.53±0.06 治疗后 42.58±6.25* 1.89±0.62* 70.82±8.04* 100.75±16.27* 9.55±1.12* 11.15±1.07* 0.86±0.09* 研究组(n=49) 治疗前 35.61±3.63 1.22±0.24 86.23±10.22 124.15±14.19 8.66±0.95 16.27±1.39 0.53±0.07 治疗后 50.34±8.24*# 2.66±0.87*# 60.08±6.11*# 84.54±10.22*# 11.06±1.45*# 6.96±0.35*# 1.59±0.13*# IL-2: 白细胞介素-2; IFN-γ: γ-干扰素; IL-5: 白细胞介素-5; IL-13: 白细胞介素-13; Th1: 辅助性T细胞1; Th2: 辅助性T细胞2;
Th1/Th2: 辅助性T细胞1/辅助性T细胞2。与治疗前比较, *P < 0.05; 与对照组比较, #P < 0.05。2.4 2组miR-146a表达水平比较
治疗前, 2组miR-146a表达水平比较，差异无统计学意义(P>0.05); 治疗后, 2组miR-146a表达水平均低于治疗前，且研究组miR-146a表达水平低于对照组，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 4。
表 4 2组miR-146a表达水平比较(x±s)组别 n 治疗前 治疗后 对照组 49 6.26±0.75 3.87±0.71* 研究组 49 6.31±0.78 2.54±0.63*# 与治疗前比较, *P < 0.05; 与对照组比较, #P < 0.05。 3. 讨论
支气管哮喘急性发作的治疗目标是缩短急性发作时间，控制气道慢性炎症损害和免疫反应相关损害，尽快解除临床症状。布地奈德福莫特罗是复合型制剂，具有较强的长效抗炎作用和持久的支气管平滑肌舒张作用，可作为支气管哮喘急性发作的急救缓解药物[7]。脾氨肽是免疫调节剂，其主要来自于健康、新鲜的动物(健康牛或猪)脾脏，成分包括肽及核苷酸类复合物，能满足人体所需的多种微量元素、免疫调节因子，具有淋巴细胞活化、受体调节、免疫信息传递，调节机体免疫系统，诱导免疫应答，增加机体免疫功能，有效控制细菌、病毒感染，减轻气道反应的作用[8-9]。本研究结果显示，研究组憋喘、咳嗽、哮鸣音、湿啰音症状改善时间均短于对照组, FEV1、FEV1/FVC、PEFam、PEFpm均高于对照组，说明布地奈德福莫特罗联合脾氨肽治疗支气管哮喘急性发作的效果更强，能快速平喘，缓解临床症状，增强机体免疫力，增加肺活量、呼气峰流速，恢复肺功能。
多种炎症细胞因子(T淋巴细胞、肥大细胞等)共同参与了支气管哮喘发作、病情进展过程。研究[10]证实，支气管哮喘患者咳嗽、憋喘等多样化临床表现的主导启动因子、调控因子是辅助性T细胞, Th1/Th2漂移在发病机制中发挥着关键性作用。Th1分泌的IL-2、IFN-γ等能增强细胞免疫应答，占优势时控制病情，预后良好; Th2分泌的IL-5、IL-13等指标能影响T细胞分化，占优势时加剧气道炎症与感染程度，预后不良[11]。支气管哮喘属于变态反应，机体Th2以及Th2分泌的细胞因子的表达水平均增高，患者普遍存在Th2反应状态。所以，促进Th1产生、抑制Th2产生，或通过诱导Th2向Th1漂移，调整促炎与抗炎之间的失衡关系，极有可能成为支气管哮喘治疗与病情控制的重要策略。本研究结果显示，研究组治疗后IL-2、IFN-γ、Th1、Th1/Th2均高于对照组, IL-5、IL-13、Th2均低于对照组，说明布地奈德福莫特罗联合脾氨肽能调节免疫平衡，改善机体免疫水平，显著抑制Th2优势反应，减弱Th2表达，有效逆转Th1/Th2漂移方向，使其向Th1偏移。Th1/Th2漂移方向的逆转可能得益于脾氨肽的免疫调节，脾氨肽富含多种免疫调节因子，能提升T淋巴细胞功能，在控制感染的同时能诱导Th1分泌，促进Th1优势反应，增强细胞免疫，调节免疫平衡。
支气管哮喘受基因、环境等诸多因素共同影响，特别是遗传因素, miRNA参与支气管哮喘发生、病情进展过程，起到重要调控作用，能辅助病情判断、预后评价[12]。miR-146a是微小RNA的一种, Treg细胞中表达量较高，参与Treg功能调控，调节机体固有免疫反应、炎性反应[13]。研究[14]报道, miR-146a参与免疫反应、炎症反应、病毒感染等，与支气管哮喘发生、病情进展有关。研究[15]发现, miR-146a通过调节支气管上皮细胞，参与气道重塑、气道炎症过程, miR-146a能调节白细胞介素1β介导的炎症反应，支气管上皮细胞受白细胞介素1β刺激后，可观察到miR-146a表达上调，同时影响白细胞介素1β诱导的白细胞介素-8与趋化因子，改变其释放进程。上述结果提示, miR-146a在气道炎症、气道重塑等病理生理过程中起到重要作用，或可成为减轻气道炎症、逆转气道重塑的有效指标。另外，采用miR-146a对支气管哮喘易感群体进行筛查，能从基因水平实现早期诊断，为个体提供最适宜的早期防治方案。本研究结果显示，研究组治疗后miR-146a表达水平低于对照组，说明布地奈德福莫特罗联合脾氨肽治疗能有效下调miR-146a表达水平。
综上所述，布地奈德福莫特罗联合脾氨肽治疗支气管哮喘急性发作效果显著，能加快症状缓解，改善肺功能，其机制可能与逆转Th1/Th2漂移方向、下调miR-146a表达水平有关。
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表 1 2组症状改善情况比较(x±s)
d 组别 n 憋喘 咳嗽 哮鸣音 湿啰音 对照组 49 3.46±1.07 7.98±1.32 6.11±1.52 6.42±1.88 研究组 49 1.92±0.62** 5.29±1.73** 4.19±1.28** 4.49±1.27** 与对照组比较, **P < 0.01。 
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表 2 2组肺功能指标比较(x±s)
组别 时点 FEV1/L FEV1/FVC/% PEFam/(L/min) PEFpm/(L/min) 对照组(n=49) 治疗前 1.46±0.43 64.46±5.63 203.43±10.19 40.32±6.35 治疗后 1.75±0.49* 67.72±7.11* 259.65±16.48* 283.45±16.33* 研究组(n=49) 治疗前 1.42±0.39 64.39±5.57 203.38±10.14 40.36±6.41 治疗后 1.97±0.55*# 71.48±8.12*# 297.02±19.68*# 311.12±24.17*# FEV1: 第1秒用力呼气量; FEV1/FVC: 第1秒用力呼气量与肺活量的比值; PEFam: 晨间测定最大呼气峰值流速;
PEFpm: 晚间测定最大呼气峰值流速。与治疗前比较, *P < 0.05; 与对照组比较, #P < 0.05。
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表 3 2组Th1/Th2漂移状况比较(x±s)
组别 时点 IL-2/(pg/mL) IFN-γ/(ng/mL) IL-5/(pg/mL) IL-13/(pg/mL) Th1/% Th2/% Th1/Th2 对照组(n=49) 治疗前 35.56±3.59 1.19±0.21 86.19±10.18 124.24±14.23 8.69±0.98 16.31±1.43 0.53±0.06 治疗后 42.58±6.25* 1.89±0.62* 70.82±8.04* 100.75±16.27* 9.55±1.12* 11.15±1.07* 0.86±0.09* 研究组(n=49) 治疗前 35.61±3.63 1.22±0.24 86.23±10.22 124.15±14.19 8.66±0.95 16.27±1.39 0.53±0.07 治疗后 50.34±8.24*# 2.66±0.87*# 60.08±6.11*# 84.54±10.22*# 11.06±1.45*# 6.96±0.35*# 1.59±0.13*# IL-2: 白细胞介素-2; IFN-γ: γ-干扰素; IL-5: 白细胞介素-5; IL-13: 白细胞介素-13; Th1: 辅助性T细胞1; Th2: 辅助性T细胞2;
Th1/Th2: 辅助性T细胞1/辅助性T细胞2。与治疗前比较, *P < 0.05; 与对照组比较, #P < 0.05。
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表 4 2组miR-146a表达水平比较(x±s)
组别 n 治疗前 治疗后 对照组 49 6.26±0.75 3.87±0.71* 研究组 49 6.31±0.78 2.54±0.63*# 与治疗前比较, *P < 0.05; 与对照组比较, #P < 0.05。
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