Effects of Qili Qiangxin Capsule on blood lipid metabolism and hemorheology in patients with coronary heart disease and angina pectoris
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摘要:目的
探讨芪苈强心胶囊影响冠心病心绞痛患者血脂代谢和血液流变学的临床机制。
方法将2020年4月—2021年8月100例冠心病心绞痛患者纳入本研究，按照随机分组原则将其分为观察组和对照组，每组50例，对照组采用常规治疗措施进行治疗，观察组在常规治疗基础上接受芪苈强心胶囊治疗。采用全自动血液流变仪分析患者治疗前后的血液流变学指标，采用自动生化分析仪检测患者血脂水平。按照《中药新药临床研究指导原则》对患者的中医证候进行评分，通过冠状动脉CT检查和光学相干断层成像（OCT）检查及图像分析冠状动脉狭窄程度。使用酶联免疫吸附测定法检测患者治疗前后炎症水平，并分析2组的治疗效果。
结果治疗后，2组患者血液流变学相关指标较治疗前降低，观察组血液流变学相关指标低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。2组患者治疗后总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）较治疗前降低，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）较治疗前升高，差异有统计学意义（P < 0.05）；观察组以上指标与对照组比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。治疗后，2组中医证候评分和冠状动脉狭窄程度较治疗前降低，且观察组中医证候评分和冠状动脉狭窄程度低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。治疗后，2组患者肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、可溶性尿激酶纤溶酶原激活物受体（suPAR）和C反应蛋白（CRP）水平较治疗前降低，且观察组TNF-α、suPAR和CRP水平较对照组低，差异有统计学意义（P < 0.05）。观察组总有效率为84.00%，高于对照组的66.00%，差异有统计学意义（P < 0.05）。
结论芪苈强心胶囊能显著改善冠心病心绞痛患者临床症状，可降低血脂水平，调节脂蛋白代谢紊乱，改善血液流变学指标，降低血液黏度。
Abstract:ObjectiveTo explore the clinical mechanism of Qili Qiangxin Capsule on blood lipid metabolism and hemorheology in patients with angina pectoris of coronary heart disease.
MethodsA total of 100 coronary heart disease patients with angina pectoris admitted to our hospital from April 2020 to August 2021 were recruited as the research objects. According to the principle of random grouping, they were divided into observation group and control group with 50 cases each group. The control group was treated with conventional treatment measures, and the observation group was treated with Qiliqiangxin capsule on the basis of conventional treatment. All patients had informed consent and signed an informed consent form before participating in the study. The general data of patients are counted according to the file information. The hemorheology indexes of patients before and after treatment were analyzed with automatic hemorheometer. Automatic biochemical analyzer was used to detect blood lipid of patients. The TCM syndrome score was conducted according to the Guiding Principles for Clinical Research of New Chinese Medicine, and the degree of coronary artery stenosis was analyzed through coronary artery CT and OCT examinations and images. Enzyme linked immunosorbent assay was used to detect the level of inflammation before and after treatment. The therapeutic effects of the two groups were analyzed.
ResultsAfter treatment, hemorheological related indexes in the two groups were lower than before treatment, and the hemorheological related indexes in the observation group were lower than those in the control group (P < 0.05). Total cholesterol (TC), triglyceride (TG) and low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) were decreased after treatment, while high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) was increased after treatment, and the above indexes in the observation group showed statistically significant differences compared with the control group (P < 0.05). After treatment, TCM syndrome score and coronary artery stenosis degree of the two groups were lower than before treatment, and were lower in the observation group than those in the control group (P < 0.05). After treatment, the levels of tumor necrosis factor-α (TNF-α), soluble urokinase plasminogen activator receptor (suPAR) and C-reactive protein (CRP) in the two groups were lower than before treatment, and their levels in the observation group were lower than those in the control group (P < 0.05). The total effective rate was 84.00%, which was higher than 66.00% in the control group, and the difference was statistically significant (P < 0.05).
ConclusionQili Qiangxin Capsules can significantly improve the clinical symptoms of patients with coronary heart disease and angina pectoris, reduce blood lipid levels, regulate lipoprotein metabolism disorders, improve blood rheology indicators, and reduce blood viscosity.
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甲状腺癌(TC)是最常见的甲状腺恶性肿瘤，约占全身恶性肿瘤的1%[1]。目前, TC多采用以手术治疗为主，辅以术后内分泌治疗、碘-131(131I)治疗的综合治疗[2]。研究[3]证实, 131I所发射的β粒子及γ射线具有强电离辐射作用，可有效清除残余甲状腺组织。然而, 131I治疗作为一种放射疗法，会对患者机体造成较大影响，131I剂量选择仍存在较大争议。研究[4]显示，TC术后行131I治疗会对患者机体造成放射性损伤，且会干扰基因表达。目前，关于不同剂量131I治疗对TC术后患者放射性损伤及基因表达情况影响的报道较少。本研究回顾性分析不同剂量131I治疗对TC患者术后抑癌基因表达、甲状腺激素及染色体畸变的影响，现将结果报告如下。
1. 资料与方法
1.1 一般资料
回顾性分析2018年1月—2020年5月120例TC术后首次行131I治疗患者的临床资料。纳入标准: ①经术后病理活检确诊者; ②无颈部淋巴结转移或远处转移者; ③术后首次行131I治疗者; ④临床资料完整者; ⑤患者及其家属知情。排除标准: ①合并严重心、肝、肾功能障碍者; ② 131I治疗不耐受者; ③合并其他恶性肿瘤者; ④术后接受其他治疗者; ⑤临床资料不完整者; ⑥妊娠、哺乳期及1年内有生育计划者; ⑦不愿参与本研究者; ⑧预计生存期 < 12个月者。根据131I治疗剂量不同分为低剂量组48例、中剂量组40例、高剂量组32例。3组患者一般资料比较，差异无统计学意义(P > 0.05), 见表 1。
表 1 3组患者一般资料比较(x±s)[n(%)]一般资料 低剂量组(n=48) 中剂量组(n=40) 高剂量组(n=32) 性别 男 18(37.50) 14(35.00) 10(31.25) 女 30(62.50) 26(65.00) 22(68.75) 年龄/岁 44.68±11.25 45.17±10.82 44.86±11.43 肿瘤直径/cm 0.83±0.23 0.92±0.17 0.93±0.25 治疗至手术时间/月 2.20±0.58 2.29±0.46 2.21±0.51 肿瘤类型 乳头状癌 34(70.83) 28(70.00) 22(68.75) 滤泡癌 14(29.17) 12(30.00) 10(31.25) TNM分期 Ⅰ期 12(25.00) 14(35.00) 8(25.00) Ⅱ期 26(54.17) 24(60.00) 20(62.50) Ⅲ期 10(20.83) 2(5.00) 4(12.50) 手术方式 单侧腺叶联合峡叶切除 38(79.17) 34(85.00) 24(75.00) 甲状腺全切 10(20.83) 6(15.00) 8(25.00) 1.2 方法
所有患者术后均接受X线、胸部CT、甲状腺超声扫描以及血常规、肝肾功能、甲状腺激素及甲状腺吸碘率测定等检查。131I治疗前3~4周停用左甲状腺素，并严格执行禁碘饮食，确保血清促甲状腺激素≥30 mU/L。服用131I前3 d, 连续口服泼尼松(天津天药药业股份有限公司，国药准字H12020689)10 mg/次, 3次/d, 连用10 d; 5 d后递减为10 mg/次, 2次/d, 预防放射性炎症所致水肿。
低剂量组空腹一次性口服131I(成都中核高通同位素股份有限公司，国药准字H10983120, 规格3 700 MBq) 1.85~2.22 GBq; 中剂量组空腹一次性口服131I 2.59~2.96 GBq; 高剂量组空腹一次性口服131I 3.33~3.70 GBq。131I治疗后2 h口服维生素C片(湖南九典制药股份有限公司，国药准字H43021720, 规格50 mg) 200 mg/次, 5~6次/d, 连用7 d。嘱患者每天多喝水，并坚持清水漱口。清除术后残留的甲状腺组织(清甲)后3~5 d口服左甲状腺素(Merck KGaA Darmstadt, 批准文号H20140052, 规格50 μg/片×100片)，初始剂量为25 μg/d, 逐渐调整为2.1 μg/kg, 直至血清促甲状腺激素维持在参考范围下限值水平，并继续保持低碘饮食。
1.3 观察指标
抑癌基因表达: 采集所有患者术中切除的TC组织标本，先行病理学检查确定组织性质，然后用生理盐水冲洗，晾干后于液氮中冷冻保存。取待检组织标本，参照RNA提取试剂盒说明书提取总RNA, 并反转录为cDNA, 以cDNA为模板行PCR扩增，扩增基因包括抑癌基因CCNG2、PTEN, 根据扩增曲线对CCNG2、PTEN基因的mRNA水平行半定量分析。取待检组织标本，滴加RI-PA裂解液后混匀，获得蛋白样本，根据免疫印迹法行Western-blot检测，抗体孵育后显影获取目的蛋白条带图，根据蛋白灰度值对CCNG2、PTEN基因的蛋白水平行半定量分析。
甲状腺激素: 分别于131I治疗前、治疗后6个月抽取5 mL空腹外周血, 3 000转/min离心处理10 min, 分离血清, -80 ℃冷存待检。采用电化学发光法检测待测血清样本中的促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平，检测采用罗氏Cobas e601型全自动电化学发光免疫分析仪及配套试剂盒。
染色体畸变: 分别于131I治疗前、治疗后7 d、治疗后3个月、治疗后6个月采集空腹外周血淋巴细胞，肝素抗凝并置入培养基中, 37 ℃下培养48 h, 细胞收集前6 h滴加秋水仙素，制片，低倍镜下观察到每个视野中分布2~5个分裂相，高倍镜下观察到染色体分布均匀即可。每份标本观察1 000个中期分裂相，记录总畸变率和双着丝粒体及着丝粒环率。
1.4 统计学方法
数据采用SPSS 22.0软件处理。计数资料以[n(%)]表示，组间比较行交叉表χ2检验，两两成对比较行连续校正χ2检验; 正态分布的计量资料以(x±s)表示，组间比较行单因素方差分析，重复测量数据采用重复测量方差分析，两两成对比较行LSD-t检验，组内治疗前后比较行配对样本t检验。P < 0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 3组患者抑癌基因表达比较
与低剂量组比较，中剂量组、高剂量组CCNG2、PTEN基因的mRNA、蛋白表达量均升高，差异有统计学意义(P < 0.05), 但中剂量组与高剂量组差异无统计学意义(P > 0.05), 见表 2。
表 2 3组患者抑癌基因表达比较(x±s)组别 n CCNG2基因 PTEN基因 mRNA水平 蛋白水平 mRNA水平 蛋白水平 低剂量组 48 197.01±17.91 179.54±17.37 169.65±23.35 206.63±29.24 中剂量组 40 278.60±29.57* 301.16±21.24* 315.18±33.46* 345.03±46.78* 高剂量组 32 280.93±31.13* 297.30±28.96* 318.29±46.69* 350.88±39.96* 与低剂量组比较, *P < 0.05。 2.2 3组患者甲状腺激素水平变化比较
治疗前, 3组TSH、FT3、FT4水平比较，差异均无统计学意义(P > 0.05); 治疗后, 3组TSH、FT3、FT4水平均较治疗前降低，且高剂量组最低，低剂量组最高，差异均有统计学意义(P < 0.05), 见表 3。
表 3 3组患者甲状腺激素水平变化比较(x±s)指标 组别 治疗前 治疗后6个月 TSH/(mU/L) 低剂量组(n=48) 66.41±18.34 56.81±15.57* 中剂量组(n=40) 67.25±18.25 50.28±12.29*# 高剂量组(n=32) 66.84±18.59 44.00±9.72*#△ FT3/(pmol/L) 低剂量组(n=48) 20.62±3.68 12.11±3.56* 中剂量组(n=40) 21.31±3.26 9.32±2.23*# 高剂量组(n=32) 20.88±3.52 6.66±1.73*#△ FT4/(pmol/L) 低剂量组(n=48) 82.69±17.74 57.14±8.59* 中剂量组(n=40) 84.25±16.28 52.22±6.24*# 高剂量组(n=32) 83.13±18.57 47.65±4.71*#△ TSH: 促甲状腺激素; FT3: 游离三碘甲腺原氨酸; FT4: 游离甲状腺素。与治疗前比较, *P < 0.05; 与低剂量组比较, #P < 0.05; 与中剂量组比较, △P < 0.05 2.3 3组患者染色体畸变情况比较
治疗前, 3组染色体总畸变率、双着丝粒体及着丝粒环率差异无统计学意义(P > 0.05); 治疗后7 d, 3组染色体总畸变率、双着丝粒体及着丝粒环率均高于治疗前，差异有统计学意义(P < 0.05); 治疗后3、6个月, 3组染色体总畸变率、双着丝粒体及着丝粒环率与治疗前比较，差异无统计学意义(P > 0.05); 3组间比较差异亦无统计学意义(P > 0.05)。见表 4。
表 4 3组患者染色体畸变情况比较(x±s)% 指标 组别 治疗前 治疗后7 d 治疗后3个月 治疗后6个月 染色体总畸变率 低剂量组(n=48) 1.10±0.35 2.63±0.71* 1.13±0.35 1.10±0.30 中剂量组(n=40) 1.11±0.34 2.79±0.65* 1.15±0.32 1.12±0.33 高剂量组(n=32) 1.09±0.33 2.98±0.44* 1.18±0.37 1.10±0.34 双着丝粒体及着丝粒环率 低剂量组(n=48) 0.03±0.01 1.00±0.24* 0.04±0.01 0.02±0.01 中剂量组(n=40) 0.03±0.01 1.10±0.23* 0.04±0.01 0.02±0.01 高剂量组(n=32) 0.03±0.01 0.98±0.30* 0.04±0.01 0.02±0.01 与治疗前比较, *P < 0.05。 3. 讨论
TC是一类常见的内分泌系统恶性肿瘤，其中分化型TC(甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡癌)约占90%[5]。分化型TC具有分化程度高、隐匿灶多、转移灶摄碘能力强等特点，临床中多采用手术联合131I和甲状腺激素的方案治疗。手术切除原发病灶后, 131I治疗可清除残留甲状腺组织，降低术后复发风险[6-7]。
胡永全等[8]研究表明, 131I进入人体后可被正常甲状腺组织和TC组织摄取，从而使131I中的β粒子及γ射线发挥杀伤TC细胞的作用。既往研究[9]表明, TC患者术后行131I治疗的有效率可达90%以上，且131I剂量越大，杀伤癌细胞效果越明显。但131I剂量过大将导致周围腺体不同程度的损伤。因此, TC患者术后行131I治疗的剂量选择是临床讨论的热点[10]。
TC发生、进展过程中，癌细胞中的多种基因表达出现异常[11]。131I杀伤癌细胞主要依靠抑制促癌基因表达及促进抑癌基因表达实现。CCNG2、PTEN基因均与TC发生有关，二者所编码蛋白是调节细胞周期的重要因子。CCNG2可与透明带抗原(PPZA)结合成复合物抑制细胞周期进程，而PTEN可激活P13K/Akt信号通路，促使细胞周期停滞于G1期[12-13]。本研究应用3种不同剂量131I治疗TC术后患者，结果表明，中剂量组、高剂量组患者CCNG2、PTEN基因的mRNA及蛋白表达水平均高于低剂量组患者，提示不同剂量131I均可促进TC术后患者CCNG2、PTEN基因表达，中、高剂量131I效果相当且均较低剂量131I强。此外，经131I治疗6个月后, 3组患者的TSH、FT3、FT4水平均较治疗前降低，且131I剂量越高, TSH、FT3、FT4水平越低，说明不同剂量131I均具备清甲作用，且高剂量131I作用更为显著。
外周血淋巴细胞的染色体畸变率是评估机体放射性损伤的指标之一，其中又以双着丝粒体及着丝粒环率最为敏感[14]。本研究结果显示, 3组患者治疗前的染色体总畸变率、双着丝粒体及着丝粒环率均处在正常范围内; 131I治疗后7 d, 3组患者的染色体总畸变率、双着丝粒体及着丝粒环率均升高，表明短期内(7 d)131I治疗会对机体造成点放射损伤，但131I治疗后3、6个月, 3组患者染色体总畸变率、双着丝粒体及着丝粒环率均恢复至正常范围，表明碘放射损伤致使染色体总畸变率、双着丝粒体及着丝粒环率升高是可逆的，且增大131I剂量并不会使患者染色体畸变率升高，分析原因可能是机体受131I治疗产生的染色体损伤有阈值以及本研究纳入样本较少。本研究认为，虽然TC患者术后接受不同剂量131I治疗未见染色体畸变率明显升高，但仍有必要定期检测染色体畸变情况，以对机体受辐射损伤程度进行评估。
综上所述，高剂量131I治疗TC术后患者可促进其抑癌基因表达，降低甲状腺激素水平，不会增高染色体畸变率，在患者耐受情况下可作为131I治疗的理想剂量。本研究局限在于样本量较少，仅比较了短期内抑癌基因表达、甲状腺激素水平及染色体畸变率变化，同时未评估不同剂量下的治疗反应，仍需大样本、长时间随访研究予以验证。
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表 1 2组患者治疗前后血液流变学指标比较(x ±s)
指标 时点 对照组(n=50) 观察组(n=50) 全血高切黏度/(mPa·s) 治疗前 6.24±0.43 6.18±0.41 治疗后 5.58±0.30* 4.32±0.26*# 全血低切黏度/(mPa·s) 治疗前 11.94±0.70 12.02±0.69 治疗后 10.49±0.61* 9.37±0.58*# 血浆黏度/(mPa·s) 治疗前 1.94±0.28 1.95±0.26 治疗后 1.41±0.20* 1.06±0.12*# 纤维蛋白原/(g/L) 治疗前 6.37±0.35 6.40±0.31 治疗后 4.38±0.25* 3.25±0.21*# 红细胞聚集指数 治疗前 5.81±0.26 5.76±0.24 治疗后 4.52±0.20* 3.97±0.19*# 与治疗前比较, * P＜0.05; 与对照组比较, #P＜0.05。 
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表 2 2组患者治疗前后血脂代谢指标比较(x ±s)
指标 时点 对照组(n=50) 观察组(n=50) TG/(mmol/L) 治疗前 2.19±0.15 2.20±0.13 治疗后 2.03±0.10* 1.86±0.09*# TC/(mmol/L) 治疗前 5.52±0.30 5.53±0.28 治疗后 5.11±0.32* 5.02±0.25*# HDL-C/(mmol/L) 治疗前 1.17±0.04 1.18±0.03 治疗后 1.27±0.03* 1.30±0.02*# LDL-C/(mmol/L) 治疗前 3.15±0.10 3.16±0.11 治疗后 2.86±0.09* 2.70±0.07*# TG: 甘油三酯; TC: 总胆固醇; LDL-C: 低密度脂蛋白胆固醇;
HDL-C: 高密度脂蛋白胆固醇。与治疗前比较, * P＜0.05;
与对照组比较, #P＜0.05。
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表 3 2组中医证候评分和冠状动脉CT检查结果比较(x ±s)
指标 时点 对照组(n=50) 观察组(n=50) 中医证候评分/分 治疗前 37.29±2.46 38.51±2.19 治疗后 26.58±1.62* 13.47±1.38*# 冠状动脉狭窄程度/% 治疗前 68.32±9.73 70.40±8.61 治疗后 57.29±6.88* 42.56±5.23*# 与治疗前比较, * P＜0.05; 与对照组比较, #P＜0.05。
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表 4 2组炎症标记物比较(x ±s)
指标 时点 对照组(n=50) 观察组(n=50) TNF-α/(pg/mL) 治疗前 4.57±0.46 4.63±0.44 治疗后 4.12±0.26* 3.56±0.25*# suPAR/(ng/mL) 治疗前 4.25±0.26 4.28±0.27 治疗后 3.69±0.23* 3.15±0.20*# CRP/(mg/L) 治疗前 2.34±0.15 2.41±0.11 治疗后 2.18±0.12* 1.95±0.10*# TNF-α: 肿瘤坏死因子α;
suPARL: 可溶性尿激酶纤溶酶原激活物受体;
CRP: C反应蛋白。与治疗前比较, * P＜0.05;
与对照组比较, #P＜0.05。
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