组蛋白去甲基化酶KDM5A通过LncRNA TRIM52-AS1调控急性髓系白血病的发生和发展

高莉, 李晓明, 杨波, 秦英, 程冬, 郑丽飞, 李里

高莉, 李晓明, 杨波, 秦英, 程冬, 郑丽飞, 李里. 组蛋白去甲基化酶KDM5A通过LncRNA TRIM52-AS1调控急性髓系白血病的发生和发展[J]. 实用临床医药杂志, 2023, 27(17): 23-28. DOI: 10.7619/jcmp.20230763
引用本文: 高莉, 李晓明, 杨波, 秦英, 程冬, 郑丽飞, 李里. 组蛋白去甲基化酶KDM5A通过LncRNA TRIM52-AS1调控急性髓系白血病的发生和发展[J]. 实用临床医药杂志, 2023, 27(17): 23-28. DOI: 10.7619/jcmp.20230763
GAO Li, LI Xiaoming, YANG Bo, QIN Ying, CHENG Dong, ZHENG Lifei, LI Li. Histone demethylase KDM5A regulates the occurrence and development of acute myeloid leukemia through LncRNA TRIM52-AS1[J]. Journal of Clinical Medicine in Practice, 2023, 27(17): 23-28. DOI: 10.7619/jcmp.20230763
Citation: GAO Li, LI Xiaoming, YANG Bo, QIN Ying, CHENG Dong, ZHENG Lifei, LI Li. Histone demethylase KDM5A regulates the occurrence and development of acute myeloid leukemia through LncRNA TRIM52-AS1[J]. Journal of Clinical Medicine in Practice, 2023, 27(17): 23-28. DOI: 10.7619/jcmp.20230763

组蛋白去甲基化酶KDM5A通过LncRNA TRIM52-AS1调控急性髓系白血病的发生和发展

基金项目: 

云南省科技厅科技计划项目 202001BA070001-178

详细信息
  • 中图分类号: R733.7;R446

Histone demethylase KDM5A regulates the occurrence and development of acute myeloid leukemia through LncRNA TRIM52-AS1

  • 摘要:
    目的 

    初步探索组蛋白去甲基化酶赖氨酸特异性去甲基化酶5(KDM5A)通过长链非编码RNA(LncRNA) TRIM52-AS1调控急性髓系白血病(AML)发生、发展的机制。

    方法 

    通过逆转录定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测白血病患者血清和各种白血病细胞中的KDM5A、TRIM52-AS1的表达。采用双荧光素酶报告实验检测KDM5A和TRIM52-AS1的靶向关系。通过CCK8实验检测KDM5A和TRIM52-AS1对HL-60细胞增殖的影响。通过Transwell实验检测KDM5A和TRIM52-AS1对HL-60细胞迁移的影响。

    结果 

    KDM5A在白血病患者血清和各种白血病细胞中高表达, TRIM52-AS1在白血病患者血清和各种白血病细胞中低表达(P < 0.05)。KDM5A可以靶向抑制TRIM52-AS1。过表达TRIM52-AS1可以抑制白血病细胞的增殖和迁移, KDM5A可以通过抑制TRIM52-AS1进而抑制白血病细胞的增殖和迁移(P < 0.05)。

    结论 

    组蛋白去甲基化酶KDM5A可通过抑制LncRNA TRIM52-AS1进而抑制AML的发生、发展。

    Abstract:
    Objective 

    To preliminarily explore the mechanism histone demethylase KDM5A in regulating the occurrence and development of acute myeloid leukemia (AML) through long non-coding RNA (LncRNA) TRIM52-AS1.

    Methods 

    The levels of KDM5A and TRIM52-AS1 were detected by real-time quantitative polymerase chain reaction (qRT-PCR) and Western blot in the serum and various leukemia cells of AML patients. The targeting relationship between KDM5A and TRIM52-AS1 was detected by dual luciferase reporter assay. The effects of KDM5A and TRIM52-AS1 on HL-60 cell proliferation were detected by CCK8 assay. The effects ofKDM5A and TRIM52-AS1 on HL-60 cell migration were detected by Transwell assay.

    Results 

    KDM5A was highly expressed in the serum and various leukemia cells of AML patients, while TRIM52-AS1 was lowly expressed (P < 0.05). KDM5A could targetedly inhibit TRIM52-AS1. Overexpression of TRIM52-AS1 could targetedly inhibit leukemia cell proliferation and migration, and KDM5A could inhibit leukemia cell proliferation and migration by inhibiting TRIM52-AS1 (P < 0.05).

    Conclusion 

    Histone demethylase KDM5A can inhibit the occurrence and developmen of AML by inhibiting LncRNA TRIM52-AS1.

  • 冠状动脉搭桥术(CABG)常用的桥梁血管来源主要有大隐静脉、桡动脉以及乳内动脉[1], 其中大隐静脉使用率高达98%[2-3]。CABG术后取大隐静脉的手术切口较长,患者下肢常出现疼痛、肿胀、麻木、皮下血肿、脂肪液化、切口感染等不良反应[4-5]。目前常用抬高取血管的下肢,促进下肢血液及淋巴液回流,进而有利于术后取血管肢体肿胀的消退[6-7]。罗珠嘉[8]研究表明,术后早期下床活动有利于CABG患者取血管肢体的术后康复。光子治疗仪在临床上应用较为广泛,顾菁华等[9]研究发现,光子治疗仪应用于外科术后伤口护理可促进伤口愈合,改善患者伤口血管微循环状态。本研究探讨光子治疗联合下肢抬高对CABG后取血管下肢恢复的影响,现报告如下。

    选取南京医科大学第一附属医院心脏大血管外科2020年1—7月CABG下肢取大隐静脉患者90例为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组45例。观察组中途脱落1例,因此共计44例,其中男28例,女16例,年龄40~70岁,平均(62.00±3.25)岁。对照组男30例,女15例,年龄41~69岁,平均(61.00±4.75)岁。2组患者性别、年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会批准同意,所有患者受试前均知情同意。

    纳入标准: ① CABG术,常规切开取下肢大隐静脉的患者; ②年龄18~80岁者; ③患者及家属知情同意,依从性高,签署手术同意书。排除标准: ①营养不良、糖尿病、肾功能不全、右心功能不全、术前下肢肿胀的患者; ②精神异常、不能沟通配合的患者; ③中途出院的患者。

    对照组采用CABG取血管的下肢术后常规护理方法,即踝泵运动、将取血管的下肢抬高10~15 °。踝泵运动: 患者躺或坐在床上,下肢伸展,大腿放松,使踝关节跖屈,至最大限度时保持10 s; 然后再背屈,至最大限度时保持10 s; 然后再做踝关节环绕动作10 s, 稍休息后可再次进行下一组动作。每组练习10次,每天共练习4组,时间分别为早、中、晚以及睡前。取血管的下肢抬高: 采用传统软垫将患者取血管的下肢抬高10~15 °, 抬高时间不固定。

    观察组在常规护理的基础上联合运用光子治疗和取血管的下肢抬高30 °。光子治疗: 采用光子治疗仪[普门(深圳)科技有限公司,粤食药监械(准)字2013第2260118号]治疗,将切口完全暴露,治疗仪面板距切口15~20 cm, 频率设为50 kHz, 启动治疗仪,治疗时间为30 min, 2次/d, 连续治疗5 d, 照射完毕后伤口消毒包扎,治疗时注意保温。取血管的下肢抬高: 采用下肢抬高垫将取血管的下肢抬高30 °, 保持患者腿部与抬高垫斜面紧密贴合,每天上午抬高2 h, 下午抬高2 h, 晚间抬高6 h; 抬高期间,中间的间断时间 < 30 min, 晚间每2 h翻身1次。

    评价2组患者的肿胀程度、疼痛评分、切口愈合时间及患者满意度。①肿胀程度=术后周径-术前周径,每天16: 00测量患者取血管的下肢的腿围,以髌骨下10 cm及脚踝上1 cm作为测量点,运用同一把皮尺,由同一人测量,所得测量值减去术前测量周径,即周径差。②采用数字疼痛评分法(NRS)描述疼痛程度,用0~10分代表不同程度的疼痛[10]。0分代表无痛; 1~3分代表轻度疼痛,疼痛能忍受,能正常生活,不影响睡眠; 4~6分代表中度疼痛,疼痛或需要止痛药,且影响睡眠; 7~9分代表重度疼痛,疼痛不能忍受,需用止痛药,影响睡眠; 10分代表剧痛,疼痛难以忍受,需用止痛药,严重影响睡眠。③本研究将切面完全封闭、无红肿渗出界定为切口愈合。由管组医生术后每天16: 00进行评估。④采用满意度调查表,术后第5天调查患者对护理工作的满意度,调查表内容包括护理人员的操作水平、难易程度以及康复效果等,总分为100分, >90分为很满意, 60~90分为满意, < 60分为不满意。护理满意度=(很满意+满意)/总例数×100%。

    采用SPSS 22.0软件进行数据分析。符合正态分布的计量资料以(x±s)表示,组间比较采用两独立样本t检验,计数资料以百分比(%)表示,比较采用χ2检验, P < 0.05为差异有统计学意义。

    术后2~3 d时, CABG患者取血管的下肢肿胀程度最为严重,但观察组患者取血管的下肢肿胀程度轻于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05), 见表 1。观察组患者第1、3、4、5天NRS评分低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05), 见表 2。观察组切口愈合时间为(5.50±0.73) d, 短于对照组的(8.02±1.34) d, 差异有统计学意义(P < 0.05)。观察组满意度为94.45%(42/44), 对照组满意度为82.22%(37/45), 差异有统计学意义(P < 0.05), 见表 3

    表  1  2组患者肿胀程度比较(x±s)  cm
    部位 时点 对照组(n=45) 观察组(n=44)
    髌骨下10 cm 第1天 4.18±0.45 4.12±0.32*
    第2天 4.62±0.45 4.45±0.88*
    第3天 4.43±1.01 4.25±0.72*
    第4天 4.10±0.45 3.67±0.81*
    第5天 3.97±0.77 3.55±0.65*
    脚踝上1 cm 第1天 4.25±0.67 3.97±0.89*
    第2天 5.01±0.62 4.65±1.01*
    第3天 4.89±1.17 4.37±0.99*
    第4天 4.56±1.67 3.82±1.12*
    第5天 4.42±0.98 3.35±0.86*
    与对照组比较, *P < 0.05。
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    表  2  2组患者NRS评分比较(x±s)  
    时点 对照组(n=45) 观察组(n=44)
    第1天 4.45±1.66 4.01±1.43*
    第2天 4.65±1.23 4.82±1.01*
    第3天 4.12±0.65 3.92±0.89*
    第4天 4.22±0.98 3.87±0.65*
    第5天 3.79±0.52 3.67±0.77*
    与对照组比较, *P < 0.05。
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    表  3  2组患者护理满意度比较
    满意情况 对照组(n=45) 观察组(n=44)
    很满意 28 34
    满意 9 8
    不满意 8 2
    满意度/% 82.22 94.45*
    与对照组比较, *P < 0.05。
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    光子治疗仪是一种新型的光疗设备,是一种半导体固态红色冷光源,最初由美国航空航天局(NASA)用于治疗宇航员肌肉萎缩以及小伤口[11]。雷晓桦[12]研究显示,光子治疗能够促进渗液吸收,有效减轻局部伤口的肿胀程度,缩短伤口愈合时间。CABG后采用光子治疗仪对取血管伤口进行照射,光子照射可被人体细胞线粒体强烈吸收,使过氧化氢酶活性增加,蛋白合成、三磷酸腺苷分解增加,加快细胞新陈代谢,加速了血运,促进伤口周围的血液循环,减少渗出,促进局部组织液的吸收,从而促进伤口肿胀的消退,缩短伤口愈合时间。本研究结果显示,术后2~3 d时CABG患者取血管的下肢肿胀程度最为严重,但观察组采用光子治疗联合下肢抬高30 °, 肿胀程度轻于对照组,且伤口愈合时间显著缩短,说明光子治疗联合下肢抬高能够显著减轻CABG患者取血管下肢的肿胀程度,且能够有效促进取血管下肢伤口的愈合。CABG在下肢取血管的患者手术切口较长,平均长度是33.99 cm[8], 术后疼痛程度较严重。术后采用光子治疗时,光子照射可刺激巨噬细胞吞噬作用,有效抑制切口炎症反应,进而减轻机体疼痛程度。陈燕群等[13]研究也证实光子治疗能够有效减轻局部伤口创面的疼痛。本研究结果显示,观察组CABG患者取血管的下肢在抬高的同时联合运用光子治疗能更有效地缓解疼痛。

    CABG患者术后取血管的下肢存在不同程度肿胀,将取血管的下肢抬高,血管内血液因重力作用流至身体较低部位,从而可以促进肿胀消退。临床上常采用传统软垫将CABG患者取血管的下肢进行抬高,但部分患者因取血管的下肢肌力较差,抬高侧肢体常常从枕被滑落,不能真正发挥抬高下肢的作用。采用专门设计的下肢抬高垫对患者较为舒适,同时因为抬高垫有凹槽,并且有固定带,所以能保证患者抬高侧肢体不发生滑落,且能保证抬高角度是固定的,因而能够保证抬高效果。赵泽雨等[14]研究表明,下肢骨折患者采用下肢抬高垫能够有效促进骨折下肢肿胀消退,减轻疼痛,提高患者舒适度,但是其研究采用的是抬高垫角度60 °, 考虑到CABG患者取血管的下肢手术切口较长,抬高角度过高会造成局部切口张力过大,影响伤口愈合,而且CABG患者术后需要取半卧位以减少回心血量,减轻心脏负担。王爱华等[15]研究表明, CABG患者术后取血管的下肢抬高30 °有利于肿胀的消退。赵杉杉等[6]研究也表明,取血管的下肢抬高30 °可以促进下肢血液回流,减轻术后肢体的肿胀。本研究采用30 °抬高垫对患者取血管的下肢进行抬高,结果表明观察组患者取血管的下肢肿胀程度轻于对照组, NRS评分第1、3、4、5天低于对照组,伤口愈合时间短于对照组。

    综上所述,光子治疗联合下肢抬高30 °能够减轻CABG患者取血管的下肢肿胀程度及下肢疼痛,促进局部切口愈合,从而提高患者对护理人员的满意度。

  • 图  1   KDM5A和TRIM52-AS1在白血病细胞中异常表达

    A: qRT-PCR检测AML患者的血清中KDM5A mRNA的表达,与正常组比较, *P < 0.05; B: qRT-PCR检测AML患者的血清中
    TRIM52-AS1 mRNA的表达,与正常组比较, *P < 0.05; C: qRT-PCR检测白血病细胞中KDM5A和TRIM52-AS1 mRNA的表达,与ARH-77比较, *P < 0.05; D: Western blot检测白血病细胞中KDM5A蛋白的表达。

    图  2   TRIM52-AS1抑制白血病细胞的增殖和迁移

    A: qRT-PCR检测TRIM52-AS1的过表达; B: CCK8实验检测过表达TRIM52-AS1后, HL-60细胞的增殖情况; C: Transwell实验检测过表达TRIM52-AS1后, HL-60细胞的迁移情况。与过表达对照组比较, *P < 0.05。所有实验均重复3次。

    图  3   KDM5A靶向抑制TRIM52-AS1

    A: qRT-PCR检测KDM5A的敲低效率; B: Western blot检测KDM5A的敲低效率; C: qRT-PCR检测敲低KDM5A后TRIM52-AS1的表达情况; D: 荧光素酶报告实验检测KDM5A对TRIM52-AS1的靶向调控。与敲低对照组比较, *P < 0.05。所有实验均重复3次。

    图  4   KDM5A通过抑制TRIM52-AS1抑制HL-60细胞增殖和迁移

    A: qRT-PCR检测各组细胞的KDM5A和TRIM52-AS1表达; B: CCK8实验检测各组细胞增殖;
    C: Transwell实验检测各组细胞迁移。两两比较, *P < 0.05。所有实验均重复3次。

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出版历程
  • 收稿日期:  2023-03-12
  • 修回日期:  2023-05-18
  • 网络出版日期:  2023-09-18
  • 刊出日期:  2023-09-14

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