K562细胞过表达MHCⅠ类相关抗原A对树突状细胞吞噬功能的影响

Effects of K562 cells with over-expression of MHC class Ⅰ chain-related protein A on phagocytosis of dendritic cells

摘要: 目的观察过表达MHC Ⅰ类相关抗原A(MICA)的K562细胞,体外经诱导凋亡后,对树突状细胞(DC)吞噬功能的影响.方法首先利用脂质体介导的基因转染技术和G418筛选过程,建立稳定表达MICA的K562细胞(K562-MICA).其次分别取K562、K562-MICA细胞经CFSE标记,并用丝裂霉素C诱导凋亡,与单核细胞系THP1或外周血单核细胞来源的DC共孵育过夜,流式细胞术检测2种细胞吞噬凋亡小体的活性.同时检测THPI细胞表面相关活化性受体的表达,以及DC表面NKG2D受体的情况.最后,在细胞共培养体系中加入NKG2D抗体,观察DC吞噬活性的变化.结果 K562-MICA细胞可刺激THP1细胞上调CD86和MICA的表达,但对HLA-DR及NKG2D的表达无明显影响.与K562细胞相比,来自K562-MICA的凋亡小体更容易被DC吞噬.K562-MICA凋亡小体可诱导DC上调NKG2D表达,NKG2D抗体具有显著拮抗DC吞噬功能的活性.结论 MICA过表达于K562细胞后具有促进DC吞噬功能的活性,这种活性依赖于DC表面NKG2D的表达.