Effect of Callicarpa nudiflora on wound healing and PI3K/AKT/mTOR pathway by regulating M2 macrophage polarization in rats with diabetic foot ulcer
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摘要:目的
分析裸花紫珠调控M2型巨噬细胞极化对糖尿病足溃疡大鼠伤口愈合及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路的影响。
方法选取40只大鼠, 将其中10只作为对照组(生理盐水外敷)，剩余30只用于建立糖尿病足溃疡大鼠模型。最终建模成功27只大鼠，并分为模型组(生理盐水外敷)、裸花紫珠组(裸花紫珠外敷)、裸花紫珠联合抑制剂组(裸花紫珠外敷联合M2型巨噬细胞标志蛋白CD206抑制剂)，每组9只。比较各组大鼠创面愈合率，碱性成纤维生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)水平，诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD16/32、CD206、PI3K、AKT、mTOR蛋白相对表达量, PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达量。
结果干预后第3、7、14天，与对照组大鼠相比，各组大鼠创面愈合率、VEGF、bFGF、CD206相对表达量以及PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达量和蛋白相对表达量均降低, iNOS、CD16/32相对表达量升高，差异有统计学意义(P < 0.05); 与模型组大鼠相比，裸花紫珠组、裸花紫珠联合抑制剂组大鼠创面愈合率、VEGF、bFGF、CD206相对表达量以及PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达量和蛋白相对表达量均升高, iNOS、CD16/32相对表达量降低，差异有统计学意义(P < 0.05); 与裸花紫珠组大鼠相比，裸花紫珠联合抑制剂组大鼠创面愈合率、VEGF、bFGF、CD206相对表达量以及PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达量和蛋白相对表达量均降低, iNOS、CD16/32相对表达量升高，差异有统计学意义(P < 0.05)。
结论裸花紫珠可促进M2型巨噬细胞极化，提高糖尿病足溃疡大鼠伤口愈合率以及VEGF、bFGF水平，激活PI3K/AKT/mTOR信号通路。
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关键词:
- 裸花紫珠 /
- M2型巨噬细胞极化 /
- 磷脂酰肌醇-3-激酶 /
- 蛋白激酶B /
- 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 /
- 糖尿病足 /
- 溃疡
Abstract:ObjectiveTo analyze the effect of Callicarpa nudiflora on wound healing and phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin (PI3K/AKT/mTOR) pathway by regulating M2 macrophage polarization in rats with diabetic foot ulcer.
MethodsA total of 40 rats were selected, with 10 rats in control group (topical application of saline), and the remaining 30 were used to establish rat model of diabetic foot ulcer. Ultimately, 27 rats were successfully modeled and divided into model group (topical application of saline), Callicarpa nudiflora group (topical application of Callicarpa nudiflora), and Callicarpa nudiflora combined with inhibitor group (topical application of Callicarpa nudiflora combined with CD206 inhibitor, a marker protein of M2 macrophages), with 9 rats in each group. The wound healing rate, levels of basic fibroblast growth factor (bFGF) and vascular endothelial growth factor (VEGF), relative expression levels of inducible nitric oxide synthase (iNOS), CD16/32, CD206, PI3K, AKT and mTOR as well as mRNA expression levels of PI3K, AKT and mTOR were compared among groups.
ResultsOn the 3rd, 7th and 14th days after intervention, compared with the control group, the wound healing rate, VEGF, bFGF, relative expression level of CD206, relative expression of PI3K, AKT and mTOR at mRNA and protein levels were significantly decreased while the relative expression levels of iNOS and CD16/32 were significantly increased in all other groups (P < 0.05); compared with the model group, the Callicarpa nudiflora group and the Callicarpa nudiflora combined with inhibitor group showed significant increased wound healing rate, VEGF, bFGF, relative expression level of CD206, and relative expression of PI3K, AKT and mTOR at mRNA and protein levels, and significant decreased relative expression levels of iNOS and CD16/32 (P < 0.05); compared with the Callicarpa nudiflora group, the Callicarpa nudiflora combined with inhibitor group showed significant decreased wound healing rate, VEGF, bFGF, relative expression level of CD206, and relative expression of PI3K, AKT and mTOR at mRNA and protein levels, and significant increased relative expression levels of iNOS and CD16/32 (P < 0.05).
ConclusionCallicarpa nudiflora can promote M2 macrophage polarization, increase wound healing rate and levels of VEGF and bFGF in rats with diabetic foot ulcer, and activate the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway.
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糖尿病患者因长期高血糖、氧化应激、周围神经病变等因素影响而易出现微血管病变，足部发生溃烂、感染等情况，严重情况下可造成残疾[1]。糖尿病足溃疡的治疗关键在于建立有效的侧支循环，进而促进血管新生并加速伤口愈合[2]。巨噬细胞极化分为M1、M2类型，其中M1型在脂多糖、干扰素γ等刺激下可分泌白细胞介素、肿瘤坏死因子-α等促炎因子，进而加重炎性反应; M2型可经介导白细胞介素-4等抗炎细胞因子表达而发挥抗炎作用; 糖尿病足溃疡局部缺血缺氧、微环境变化可造成巨噬细胞表型异常, M2巨噬细胞比例、数量随之降低[3]。磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)是参与细胞增殖、蛋白合成、细胞代谢、炎性反应的信号通路, PI3K/AKT/mTOR通路激活后可刺激白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α分泌，并可激活粒细胞，发挥促炎作用[4]。裸花紫珠包含酚萜类、挥发油、黄酮类等化学成分，具有消肿、解毒、止血、散瘀的作用[5]。本研究分析裸花紫珠调控M2巨噬细胞极化对糖尿病足溃疡大鼠伤口愈合及PI3K/AKT/mTOR通路的影响，现报告如下。
1. 材料与方法
1.1 研究动物
选取40只无特定病原体(SPF)级Wistar大鼠[希格生科(深圳)有限公司, SYXK(粤)2023-0314], 体质量200~230 g。所有大鼠均在无病原菌笼子中进行7 d适应性喂养，无病原菌笼子每日在180 ℃下干烤消毒30 min, 参照动物试验伦理要求的相关规定进行本试验操作。
1.2 方法
1.2.1 分组与建模
取10只大鼠作为对照组，进行28 d普通饲料喂养; 进行12 h禁食、禁水，腹腔注射60 mg/kg的0.9%氯化钠溶液共7 d, 并在第8天建立足部圆形全层皮肤组织
缺失，直径约0.5 cm。剩余30只大鼠参照景亮等[6]研究方法建立糖尿病足溃疡模型，喂养高糖、高脂饲料(1%胆酸钠、20%蔗糖、10%猪油、67%普通饲料、2%胆固醇)，共28 d; 一次性腹腔注射65.0 mg/kg链脲佐菌素(STZ), 待大鼠空腹血糖≥16.7 mmol/L持续2周后，腹腔注射2%戊巴比妥钠进行麻醉，做一大小为3 mm×7 mm的印章标记，将后足部剃毛、消毒，剪皮至筋膜，以大鼠伤口出现暗红色渗出液及渗血为建模成功。共建模成功27只，将其分为模型组、裸花紫珠组、裸花紫珠联合抑制剂组，每组9只。
1.2.2 干预方法
裸花紫珠组给予裸花紫珠(干燥、粉碎、过筛裸花紫珠粉，先加水浸泡2 h，再加热回流提取，共3次，以药物质量与水量比例为1∶ 10萃取1 h, 过滤、蒸发、干燥，获得最终提取物，质量浓度为95.96 μg/mL)加生理盐水外敷。裸花紫珠联合抑制剂组在裸花紫珠外敷干预基础上给予M2巨噬细胞标志蛋白CD206抑制剂(北京博奥森生物技术有限公司)60 mg/kg。对照组、模型组给予生理盐水外敷，上述各组均连续干预14 d。
1.3 指标检测
1.3.1 一般情况观察
干预14 d后，对大鼠摄食量、饮水、活动、毛发、精神等一般情况进行观察。
1.3.2 病理学观察
干预14 d后，麻醉后处死大鼠，取足部创面组织，一部分置于-80 ℃环境中保存待检，另一部分用石蜡包埋，分切为4 μm切片，经苏木精-伊红(HE)染色，显微镜下观察创面组织的病理改变。
1.3.3 创面愈合率检测
干预后第3、7、14天，在创面处贴透明膜(带网格)，创面面积采用扫描仪及Adobe Photoshop CS6软件进行计算。创面愈合率=(干预后创面面积-干预前创面面积)/干预前创面面积×100%。
1.3.4 血管生成因子检测
干预14 d后，处死大鼠前取尾静脉血3 mL, 4 ℃下离心15 min(3 000 r/min, 半径10 cm), 碱性成纤维生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)水平采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法进行检测, ELISA试剂盒购自山东蓝都生物科技有限公司。
1.3.5 M1型、M2型巨噬细胞标志蛋白、PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的相对表达量检测
取步骤1.3.2中保存待检足部创面组织，诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD16/32、CD206、PI3K、AKT、mTOR相对表达量通过Western Blot法检测。液氮研磨各组创面组织，而后在裂解液中加入蛋白酶抑制剂，放置1 h; 蛋白浓度使用BCA法检测，而后加入上样缓冲液, 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE), 结束后将蛋白电转至聚偏氟乙烯(PVDF)膜上，进行封闭; iNOS、CD16/32、CD206、PI3K、AKT、mTOR2一抗(1∶ 1 000)于摇床上室温孵育，共孵育120 min, 洗涤后加入iNOS、CD16/32、CD206、PI3K、AKT、mTOR二抗(1∶ 1 000), 孵育90 min, 再次洗涤，使用ECL检测条带，以GAPDH为内参，相对条带灰度光密度值采用Image J软件分析。
1.3.6 PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量检测
取步骤1.3.2中保存待检足部创面组织, PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量采用实时荧光定量法进行鉴定，提取组织总RNA, 而后逆转录为cDNA, 引物序列采用Primer 5.0软件设计，启动PCR仪, PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量通过2-△△Ct方法计算。
1.4 统计学分析
采用SPSS 19.0统计软件包进行分析处理。计量资料采用(x±s)描述，多组间比较采用方差齐性检验，两组间比较采用重复测量的方差分析, P < 0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 大鼠一般情况
对照组大鼠行动敏捷，精神状态良好，饮水、进食、排便均正常，毛发光亮; 模型组大鼠毛色发黄，饮水增多，活动减少; 裸花紫珠组大鼠饮水正常，运动减少，毛色正常; 裸花紫珠联合抑制剂组大鼠饮水、排便增多，毛色浅黄。
2.2 病理学观察
HE染色结果显示，对照组创面肉芽组织排列整齐、结构完整，无炎性细胞浸润; 模型组肉芽组织毛细血管、成纤维细胞损害严重，且炎性细胞浸润严重; 裸花紫珠组肉芽组织毛细血管坏死减轻，炎性细胞浸润基本消失; 裸花紫珠联合抑制剂组肉芽组织毛细血管增多，炎性细胞浸润有所缓解。见图 1。
2.3 各组大鼠创面愈合率比较
干预后第3、7、14天，与对照组大鼠相比，各组大鼠创面愈合率均降低，差异有统计学意义(P < 0.05); 与模型组大鼠相比，裸花紫珠组、裸花紫珠联合抑制剂组大鼠创面愈合率均升高，差异有统计学意义(P < 0.05); 与裸花紫珠组大鼠相比，裸花紫珠联合抑制剂组大鼠创面愈合率降低，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 1。
表 1 各组大鼠创面愈合率比较(x±s)% 组别 n 干预后第3天 干预后第7天 干预后第14天 对照组 10 36.23±4.01 52.36±5.27 76.88±8.01 模型组 9 10.12±1.27* 18.01±2.56* 32.73±3.01* 裸花紫珠组 9 32.01±3.89*# 46.01±4.23*# 70.01±7.29*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 14.29±1.58*#△ 22.01±2.67*#△ 36.01±3.55*#△ F 15.342 15.544 14.082 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 与对照组比较, * P＜0.05; 与模型组相比, #P＜0.05; 与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。 2.4 各组大鼠血管生成因子水平比较
与对照组大鼠相比，各组大鼠VEGF、bFGF水平均降低，差异有统计学意义(P < 0.05); 与模型组大鼠相比，裸花紫珠组、裸花紫珠联合抑制剂组大鼠VEGF、bFGF水平均升高，差异有统计学意义(P < 0.05); 与裸花紫珠组大鼠相比，裸花紫珠联合抑制剂组大鼠VEGF、bFGF水平均降低，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 2。
表 2 各组大鼠血管生成因子水平比较(x±s)pg/mL 组别 n VEGF bFGF 对照组 10 136.01±20.59 101.48±12.76 模型组 9 79.01±10.36* 62.89±6.45* 裸花紫珠组 9 125.01±16.01*# 92.58±9.36*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 86.77±11.48*#△ 70.01±7.29*#△ F 6.332 6.495 P ＜0.001 ＜0.001 VEGF: 血管内皮生长因子; bFGF: 碱性成纤维生长因子; 与对照组比较, * P＜0.05; 与模型组相比, #P＜0.05;
与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。2.5 各组大鼠M1型、M2型巨噬细胞标志蛋白相对表达量比较
与对照组大鼠相比，各组大鼠iNOS、CD16/32相对表达量升高, CD206相对表达量降低，差异有统计学意义(P < 0.05); 与模型组大鼠相比，裸花紫珠组、裸花紫珠联合抑制剂组大鼠iNOS、CD16/32相对表达量降低, CD206相对表达量升高，差异有统计学意义(P < 0.05); 与裸花紫珠组大鼠相比，裸花紫珠联合抑制剂组大鼠iNOS、CD16/32相对表达量升高, CD206相对表达量降低，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 3、图 2。
表 3 各组大鼠M1型、M2型巨噬细胞标志蛋白相对表达量(x±s)组别 n iNOS CD16/32 CD206 对照组 10 1.00±0.01 1.00±0.01 1.00±0.01 模型组 9 2.03±0.25* 2.10±0.27* 0.42±0.03* 裸花紫珠组 9 1.23±0.06*# 1.31±0.07*# 0.83±0.07*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 1.70±0.18*#△ 1.68±0.10*#△ 0.61±0.05*#△ F 12.317 21.454 20.671 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 iNOS: 诱导型一氧化氮合成酶; 与对照组比较, * P＜0.05; 与模型组相比, #P＜0.05; 与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。 2.6 各组大鼠 PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量比较
与对照组大鼠相比，各组大鼠 PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量降低，差异有统计学意义(P < 0.05); 与模型组大鼠相比，裸花紫珠组、裸花紫珠联合抑制剂组大鼠 PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量升高，差异有统计学意义(P < 0.05); 与裸花紫珠组大鼠相比，裸花紫珠联合抑制剂组大鼠 PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量降低，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 4。
表 4 各组大鼠 PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量比较(x±s)组别 n PI3K mRNA AKT mRNA mTOR mRNA 对照组 10 1.00±0.01 1.00±0.01 1.00±0.01 模型组 9 0.36±0.02* 0.42±0.03* 0.40±0.05* 裸花紫珠组 9 0.82±0.09*# 0.83±0.10*# 0.79±0.08*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 0.60±0.07*#△ 0.61±0.08*#△ 0.53±0.07*#△ F 17.925 15.333 21.062 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 PI3K: 磷脂酰肌醇-3-激酶; AKT: 蛋白激酶B; mTOR: 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白。与对照组比较, * P＜0.05;
与模型组相比, #P＜0.05; 与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。2.7 各组大鼠PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白相对表达量比较
与对照组大鼠相比，各组大鼠PI3K、AKT、mTOR蛋白相对表达量降低，差异有统计学意义(P < 0.05); 与模型组大鼠相比，裸花紫珠组、裸花紫珠联合抑制剂组大鼠PI3K、AKT、mTOR蛋白相对表达量升高，差异有统计学意义(P < 0.05); 与裸花紫珠组相比，裸花紫珠联合抑制剂组大鼠PI3K、AKT、mTOR蛋白相对表达量降低，差异有统计学意义(P < 0.05)。见表 5、图 3。
表 5 各组大鼠PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白相对表达量(x±s)组别 n PI3K蛋白表达 AKT蛋白表达 mTOR蛋白表达 对照组 10 1.00±0.01 1.00±0.01 1.00±0.01 模型组 9 0.25±0.03* 0.31±0.03* 0.38±0.04* 裸花紫珠组 9 0.79±0.11*# 0.82±0.08*# 0.76±0.08*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 0.58±0.05*#△ 0.60±0.06*#△ 0.55±0.06*#△ F 26.070 20.828 23.432 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 PI3K: 磷脂酰肌醇-3-激酶; AKT: 蛋白激酶B; mTOR: 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白。与对照组比较, * P＜0.05;
与模型组相比, #P＜0.05; 与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。3. 讨论
中医认为糖尿病足溃疡属“筋疽”“消渴”“脱疽”等范畴，主要病机为经络处邪毒淤热凝滞致使肌肤失养、血运不畅，创面多平塌下陷、脓液稀薄、色泽晦暗，新生肉芽紫暗或苍白，治疗应以去腐生肌、活血化瘀、活血通脉、清热解毒为主[7-9]。裸花紫珠的主要成分为羟基化合物、糖类、黄酮类化合物、树脂、缩合鞣质等，具有解毒、止血、驱风、活血、祛湿等功效。现代药理学研究[10]表明，裸花紫珠具有降低毛细血管通透性、抑制致病微生物、抑制炎症肿胀、缩短凝血时间、增强机体免疫力、阻碍血栓形成等功效，多用于外伤出血、烫伤、烧伤等疾病的治疗。
皮肤组织伤口愈合经历了凝血、炎性反应、上皮化形成、组织重塑共4个过程，组织中巨噬细胞、成纤维细胞、成胶质细胞、内皮细胞均在伤口愈合中发挥着作用[11]。血液中的早期T淋巴细胞、骨髓造血干细胞、单核细胞等在多种因素刺激下可分化为巨噬细胞，而后在全身组织、血液中分布，经分泌多种细胞、抗原提呈、吞噬等作用而参与代谢、修复、防御、炎症等病理、生理过程，是自身稳定维持的关键[12-14]。M1型巨噬细胞可促进趋化因子、炎性细胞因子分泌，而M2型巨噬细胞可分泌抗炎细胞因子而抑制免疫应答，发挥了抗炎作用[15]。研究[16]显示M1型巨噬细胞标志蛋白包括iNOS、CD16/32, 而M2型巨噬细胞标志蛋白为CD206。本研究结果显示，裸花紫珠组iNOS、CD16/32表达量降低，而CD206表达量升高，表明裸花紫珠可促进M2型巨噬细胞极化，从而改善糖尿病足溃疡病情。
VEGF具有促单核细胞迁移、血管内皮细胞分裂、血管生成的作用，而后经血管壁融合、重塑，建立侧支动脉循环，有利于组织血液供应[17-18]。bFGF是具有趋化创面处成纤维细胞、炎症细胞功能的生长因子，其表达升高可加速细胞增殖，提高生长因子受体活性，加速肉芽组织生长，从而改善局部营养状态及抗感染能力[19-20]。PI3K/AKT/mTOR可经炎症反应激活以参与感染性疾病的发生和发展，通路中的PI3K为上游启动因子，在生长因子刺激下，可激活AKT、mTOR，从而加速内皮细胞生长、增殖及迁移，形成新的微血管，促进伤口愈合[21-22]。本研究结果显示，裸花紫珠组伤口愈合率、VEGF、bFGF、PI3K、AKT、mTOR表达量均升高，提示裸花紫珠可激活PI3K/AKT/mTOR信号通路，上调VEGF、bFGF表达，其机制可能与M2型巨噬细胞极化有关。
综上所述，本研究发现裸花紫珠可促进M2型巨噬细胞极化，提高糖尿病足溃疡大鼠伤口愈合率以及VEGF、bFGF水平，激活PI3K/AKT/mTOR信号通路。
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表 1 各组大鼠创面愈合率比较(x±s)
% 组别 n 干预后第3天 干预后第7天 干预后第14天 对照组 10 36.23±4.01 52.36±5.27 76.88±8.01 模型组 9 10.12±1.27* 18.01±2.56* 32.73±3.01* 裸花紫珠组 9 32.01±3.89*# 46.01±4.23*# 70.01±7.29*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 14.29±1.58*#△ 22.01±2.67*#△ 36.01±3.55*#△ F 15.342 15.544 14.082 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 与对照组比较, * P＜0.05; 与模型组相比, #P＜0.05; 与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。 
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表 2 各组大鼠血管生成因子水平比较(x±s)
pg/mL 组别 n VEGF bFGF 对照组 10 136.01±20.59 101.48±12.76 模型组 9 79.01±10.36* 62.89±6.45* 裸花紫珠组 9 125.01±16.01*# 92.58±9.36*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 86.77±11.48*#△ 70.01±7.29*#△ F 6.332 6.495 P ＜0.001 ＜0.001 VEGF: 血管内皮生长因子; bFGF: 碱性成纤维生长因子; 与对照组比较, * P＜0.05; 与模型组相比, #P＜0.05;
与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。
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表 3 各组大鼠M1型、M2型巨噬细胞标志蛋白相对表达量(x±s)
组别 n iNOS CD16/32 CD206 对照组 10 1.00±0.01 1.00±0.01 1.00±0.01 模型组 9 2.03±0.25* 2.10±0.27* 0.42±0.03* 裸花紫珠组 9 1.23±0.06*# 1.31±0.07*# 0.83±0.07*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 1.70±0.18*#△ 1.68±0.10*#△ 0.61±0.05*#△ F 12.317 21.454 20.671 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 iNOS: 诱导型一氧化氮合成酶; 与对照组比较, * P＜0.05; 与模型组相比, #P＜0.05; 与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。
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表 4 各组大鼠 PI3K、AKT、mTOR 的mRNA表达量比较(x±s)
组别 n PI3K mRNA AKT mRNA mTOR mRNA 对照组 10 1.00±0.01 1.00±0.01 1.00±0.01 模型组 9 0.36±0.02* 0.42±0.03* 0.40±0.05* 裸花紫珠组 9 0.82±0.09*# 0.83±0.10*# 0.79±0.08*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 0.60±0.07*#△ 0.61±0.08*#△ 0.53±0.07*#△ F 17.925 15.333 21.062 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 PI3K: 磷脂酰肌醇-3-激酶; AKT: 蛋白激酶B; mTOR: 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白。与对照组比较, * P＜0.05;
与模型组相比, #P＜0.05; 与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。
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表 5 各组大鼠PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白相对表达量(x±s)
组别 n PI3K蛋白表达 AKT蛋白表达 mTOR蛋白表达 对照组 10 1.00±0.01 1.00±0.01 1.00±0.01 模型组 9 0.25±0.03* 0.31±0.03* 0.38±0.04* 裸花紫珠组 9 0.79±0.11*# 0.82±0.08*# 0.76±0.08*# 裸花紫珠联合抑制剂组 9 0.58±0.05*#△ 0.60±0.06*#△ 0.55±0.06*#△ F 26.070 20.828 23.432 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 PI3K: 磷脂酰肌醇-3-激酶; AKT: 蛋白激酶B; mTOR: 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白。与对照组比较, * P＜0.05;
与模型组相比, #P＜0.05; 与裸花紫珠组相比, △P＜0.05。
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