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周瑞祥, 黄茂. SARS病毒S蛋白编码基因表达载体的构建及在Vero细胞中的表达[J]. 实用临床医药杂志, 2006, (5): 22-26. DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2006.05.006
引用本文: 周瑞祥, 黄茂. SARS病毒S蛋白编码基因表达载体的构建及在Vero细胞中的表达[J]. 实用临床医药杂志, 2006, (5): 22-26. DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2006.05.006
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ZHOU Rui-xiang, HUANG Mao. CONSTRUCTION OF RECOMBINANT VECTOR CONTAINING SARS-CoV S PROTEIN CODING GENE AND ITS EXPRESSION IN Vero CELL[J]. Journal of Clinical Medicine in Practice, 2006, (5): 22-26. DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2006.05.006
Citation: ZHOU Rui-xiang, HUANG Mao. CONSTRUCTION OF RECOMBINANT VECTOR CONTAINING SARS-CoV S PROTEIN CODING GENE AND ITS EXPRESSION IN Vero CELL[J]. Journal of Clinical Medicine in Practice, 2006, (5): 22-26. DOI: 10.3969/j.issn.1672-2353.2006.05.006
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SARS病毒S蛋白编码基因表达载体的构建及在Vero细胞中的表达

CONSTRUCTION OF RECOMBINANT VECTOR CONTAINING SARS-CoV S PROTEIN CODING GENE AND ITS EXPRESSION IN Vero CELL

    摘要
  • 摘要: 目的构建含SARS病毒S蛋白编码基因片段的表达载体,并将其置于Vero细胞中表达.方法设计1对PCR引物,在其下游引入Flag序列,通过PCR方法从质粒pGEX-6P-1-SARS-S中扩增出S蛋白编码基因, PCR产物经酶切后,插入表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-SARS-S.重组质粒经酶切鉴定及核苷酸序列测定和分析后转染Vero细胞,用抗Flag单克隆抗体通过Western blot检测S蛋白片段在Vero细胞中的表达.结果酶切鉴定及核苷酸序列测定和分析示重组质粒构建完全正确;Western blot证实重组S蛋白片段能够在Vero细胞表达.结论融合Flag序列的SARS病毒S蛋白片段在Vero细胞中获得了正确表达.

     

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