Progress in detection of oropharyngeal human papillomavirus infection
-
摘要: 人乳头瘤病毒(HPV)是一种仅感染人类的双链DNA病毒，口咽部HPV感染可引起口腔潜在恶性疾病与头颈部鳞状细胞癌等不良后果，口咽部HPV感染的检测是早期诊断与治疗的关键。近年来，以核酸检测与免疫组化(IHC)作为检测HPV的主流方法，其他多种替代方法也得到了迅速发展。本文综述了口咽部HPV感染的不良后果与检测方法的研究进展，以期为临床应用提供参考依据。Abstract:Human papillomavirus (HPV) is a double-stranded DNA virus that only infects humans. Oropharyngeal HPV infection can cause potential oral malignant diseases as well as head and neck squamous cell carcinoma and other adverse consequences. Detection of oropharyngeal HPV infection is the key to early diagnosis and treatment. In recent years, nucleic acid detection and immunohistochemistry (IHC) are the mainstream method for the HPV detection, and many alternative methods have also been rapidly developed. This article reviewed the research progress of adverse effects and detection methods of oropharyngeal HPV infection, so as to provide reference for clinical application.
-
人乳头瘤病毒(HPV)属于乳多空病毒科中的乳头瘤病毒属，为球形无包膜的双链DNA病毒，HPV感染具有高度的种属特异性，人类是其唯一宿主[1]。HPV具有200多种类型，不同HPV类型具有感染不同身体部位的倾向[2]，从而引起不同疾病。HPV 6型和11型常感染肛门生殖器引起良性生殖器疣[3]，HPV 16型感染口腔和咽喉黏膜可引起口咽部潜在恶性疾病与鳞状细胞癌等多种不良后果。HPV 16型和18型与阴道、宫颈、肛门或阴茎的鳞状上皮内病变或癌有关[4-5]。对于HPV在不同部位的感染，采用相应的检测方法对相关疾病的早期诊断与治疗具有重大意义。本文综述了口咽部HPV感染引起的不良后果和口咽部HPV感染检测方法的研究进展，并对不同方法的原理与性能进行了对比。
1. 口咽部HPV感染的不良后果
1.1 口腔潜在恶性疾病(OPMD)
OPMD的概念于2005年由WHO提出，旨在定义具有转化为口腔鳞状细胞癌潜力的口腔表现，包括白斑、黏膜下纤维性变和扁平苔藓等[6-7], 其中以口腔白斑最为常见，全球患病率为1%~3%[7]。HPV感染是OPMD的危险因素之一, HPV感染与口腔扁平苔藓和口腔白斑显著相关[8], 常为HPV 16型或18型感染。荟萃分析[9]表明，白斑合并HPV患病率为20.2%, 扁平苔藓为23.0%, 口腔黏膜下纤维化为28.6%。高危HPV在OPMD的恶性转化中起到重要作用, HPV E6和E7蛋白可以调节包括p53功能丧失、抗凋亡功能增强和端粒酶活性增加等多种细胞变化[10]。
1.2 头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)
HNSCC主要指起源于口腔、鼻腔、咽喉部位的鳞状细胞癌，是全世界发病率第六的恶性肿瘤, 2018年全球共有89万新发病例, 45万死亡病例[11-12]。根据是否存在HPV感染可分为HPV阳性HNSCC和HPV阴性HNSCC, 其中HPV阳性HNSCC患者具有更好的预后[13-14]。根据2016年的统计数据，全世界口咽部鳞状细胞癌(OPSCC)中HPV阳性率为20.6%, 喉癌中为23.6%, 鼻窦癌中为29.6%, 鼻咽癌中为31.1% [15], 以HPV-16型和HPV-18型等高危HPV感染为主[16]。其中男性HPV阳性HNSCC患病率是女性的3~6倍，其原因可能为男男性行为导致的肛门生殖器和口咽部HPV持续感染[17]。
感染HPV是HPV阳性HNSCC的早期事件，经口性行为是引起口咽部HPV感染的主要因素, HPV病毒可通过破损的口腔上皮或扁桃体隐窝进入口腔上皮基底层[18]。在HPV阳性HNSCC的发展过程中，HPV病毒基因组能稳定整合到宿主干细胞或增生的基底细胞基因中。在宿主细胞的致癌转化中, HPV E6和E7蛋白起主要作用, E6蛋白与肿瘤抑制因子p53形成复合物，促进p53的泛素化和蛋白酶体降解[19]。E7蛋白与视网膜母细胞瘤基因1(RB1)紧密结合，促进蛋白酶体降解RB1，导致E2F家族的转录因子释放[20], 使细胞进入S期，驱动细胞周期进展，促进细胞转化为癌细胞[21]。
2. 口咽部HPV检测方法
目前，已经开发出多种检测口咽部病变中HPV的方法，包括核酸检测法(HPV DNA检测和E6/E7 mRNA检测)、免疫组化(IHC)、原位杂交法(ISH)和血清学等方法。
2.1 核酸检测法
2.1.1
HPV DNA聚合酶链式反应(PCR)检测HPV DNA是一种具有高灵敏度且较为简便廉价的技术，常使用通用引物如PGMY09/PGMY1和GP5+/GP6+靶向扩增HPV DNA保守序列(L1基因)，扩增后使用凝胶电泳、限制性片段长度多态性或直接测序的方法鉴定HPV基因型。荟萃分析[22]表明, PCR法的灵敏度和特异性分别为94%~100%和74%~92%。PCR法适用于各类标本，但由于其高灵敏度，标本制备或采样过程中的交叉污染容易导致假阳性[23]。同时，由于HPV的一过性感染不足以发展为癌，仅进行HPV DNA检测并不能提供病毒转录的信息，难以证明HPV的病毒感染活性，因此HPV DNA检测常与其他方法结合能够提高灵敏度。
2.1.2
E6/E7 mRNA检测HPV的持续感染并驱动细胞的恶性转化基于E6和E7蛋白的表达，因此检测E6或E7蛋白的表达可确定样品是否为HPV驱动的肿瘤。采用逆转录(RT)与实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)方法对E6/E7 mRNA进行扩增和鉴定是目前鉴定HPV阳性HNSCC的金标准[24], 但由于mRNA在环境中容易降解，该方法对标本要求较高，需新鲜或冰冻的组织样品[25]。由于进行实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术要求较为复杂、成本较高等原因，现难以用于对HPV阳性头颈部鳞状细胞癌的常规筛查。
2.2 免疫组化法
目前已有研究[26-28]将p16蛋白免疫组化(IHC)作为诊断HPV感染的替代指标。美国病理学家学院以及美国临床肿瘤学会指南[29-30]也建议使用p16 IHC对HNSCC的肿瘤样本进行HPV检测。当HPV感染鳞状上皮细胞时, HPV E7基因表达，使CDK4抑制因子Rb失活，破坏其与转录因子E2F结合的能力，引起细胞增殖失调。异常增殖的细胞中，CDK4抑制剂p16蛋白过度表达，因此可将p16上调作为HPV感染的替代指标[31]。相关分析[32-35]表明, p16蛋白表达在诊断口咽鳞状细胞癌中的HPV感染时敏感度为80%~90%，特异度约为80%~90%。由于其检测成本较其他方法低2~6倍[36], 并可用于福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)的组织样品, p16 IHC在进行HPV阳性HNSCC的大规模筛查中较为适用。PRIGGE E S等[22]研究表明, IHC-p16与HPV-DNA结合检测能显著提高诊断HPV的特异度，这种检测新策略更适合于需要降级治疗的患者。
2.3 原位杂交法
2.3.1
靶向DNA的原位杂交(DNA ISH)DNA ISH技术将特定标记的探针与组织切片中的DNA杂交，可直接观察组织切片中细胞内的靶向DNA, 根据常规光学显微镜可判读阳性结果并准确反映HPV的存在。目前已开发出多种商业DNA ISH检测试剂盒，包括Enzo、Ventana和TellgenplexTM HPV DNA试剂盒，可识别HPV 16、18型等多种HPV亚型[37-38]。但HPV DNA ISH技术多用于对宫颈癌HPV检测中，在头颈部鳞状细胞癌中由于背景信号阻碍DNA标记信号的识别，易导致假阴性的产生。研究[39]表明，当肿瘤细胞中HPV拷贝数小于100时25%~45%的病例被报告为假阴性。
2.3.2
靶向RNA的原位杂交(RNA ISH)由于DNA ISH技术假阴性率高的原因，更多研究[33-34, 40]倾向于使用RNA ISH法来检测HNSCC中的HPV。以RNA RT-qPCR作为金标准, HPV ISH的灵敏度为87%~100%, 特异度为88%~100%, 具有较高的检测性能。RNA ISH技术灵敏度和特异度主要取决于探针的选择，其中RNAscope技术适用小体积探针，可与部分降解的mRNA杂交，具有在石蜡包埋的组织样品中进行检测的优势，可同时对高风险HPV与HPV活动性感染提供依据。但由于该方法成本较高，目前仅用于科学研究，尚未被推荐用于临床常规使用[41]。
2.4 血清学方法
在口咽部HPV的血清学检测中，基于HPV 16型的生物标志物研究最多, HPV16 E6抗体已被确定为HPV相关口腔癌的早期生物标志物，可通过Luminex和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法对血清中的抗体进行检测[42]。LANG KUHS K A等[43]研究表明, HPV16 E6抗体在HPV相关口腔癌的诊断中灵敏度为90%, 特异度为96%。除E6抗体以外，针对HPV16 L1抗体的快速检测方法PrevocheckⓇ也表现出较好的灵敏度和特异度[44]。但由于缺乏足够的临床数据, E6抗体检测的方法还未应用于常规临床检测。有研究[45]评估了叶酸、胰岛素样生长因子(IGF)-1、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)-3和干扰素-γ(IFN-γ)水平作为HPV相关肿瘤的候选标志物，但总体有效性较差，相比直接检测HPV抗体特异性较低。
2.5 方法比较
在多种口咽部HPV感染的检测方法中, p16蛋白免疫组化染色法是目前成本最低的技术，适合于对HPV阳性HNSCC患者的早期筛查，但该方法也存在一定的误诊率和漏诊率，需结合其他方法结果进行确诊。2种原位杂交方法中, RNA ISH体现出了较高的检测性能，但由于成本较高，临床常规使用难以普及; DNA ISH可能出现由于技术原因难以判读结果所带来的假阴性，导致漏诊率较高，也较少用于临床。E6/E7 mRNA检测是目前鉴定HPV阳性HNSCC的金标准，但要求新鲜或者冷冻的组织样本，对于临床更常见的FFPE样本，常使用DNA PCR的检测方法。综上，对于口咽部HPV感染的检测，可在前期使用p16免疫组化染色法，当观察到染色阳性时，再使用从FFPE样品中提取的DNA使用PCR法进行确认。该策略在荷兰与英国的研究[24, 46]中获得了验证，灵敏度和特异度可达到100%，但此方法耗时较长，可能延长日常临床工作中的诊断时间。
3. 展望
HNSCC是全球常见的恶性肿瘤之一，口咽部HPV感染是其主要病因，对患有OPMD等口腔特征表现的重点人群进行口咽HPV感染的筛查具有一定的必要性，早期检测高危HPV可更准确地诊断癌前病变和早期癌。在检测方面，目前核酸扩增法与IHC是主要的HPV抗原检测手段，同时也存在多种替代方法协助诊断患者是否存在HPV感染，可根据地区特点与实验室条件选用适宜的检测方法。随着各种新型检测技术的不断进步，有望在未来研究出具有高灵敏度和特异度，且成本控制较低的单步法检测技术应用于口咽部HPV的检测中。
-
[1] BRAVO I G, FÉLEZ-SÁNCHEZ M. Papillomaviruses: Viral evolution, cancer and evolutionary medicine[J]. Evol Med Public Health, 2015, 2015(1): 32-51. doi: 10.1093/emph/eov003
[2] SCHIFFMAN M, DOORBAR J, WENTZENSEN N, et al. Carcinogenic human papillomavirus infection[J]. Nat Rev Dis Primers, 2016, 2: 16086. doi: 10.1038/nrdp.2016.86
[3] 中华医学会皮肤性病学分会, 中国医师协会皮肤科医师分会, 中国康复医学会皮肤性病委员会. 中国尖锐湿疣临床诊疗指南(2021完整版)[J]. 中国皮肤性病学杂志, 2021, 35(4): 359-374. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZBFX202104001.htm [4] LEEMANS C R, SNIJDERS P J F, BRAKENHOFF R H. The molecular landscape of head and neck cancer[J]. Nat Rev Cancer, 2018, 18(5): 269-282. doi: 10.1038/nrc.2018.11
[5] 翟青枝, 王雪琪, 于丹, 等. 高级别宫颈上皮内瘤变患者高危型人乳头瘤病毒型别分布及其预后[J]. 中华医院感染学杂志, 2021, 31(10): 1576-1580. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZHYY202110030.htm [6] KOYFMAN S A, ISMAILA N, CROOK D, et al. Management of the neck in squamous cell carcinoma of the oral cavity and oropharynx: ASCO clinical practice guideline[J]. J Clin Oncol, 2019, 37(20): 1753-1774. doi: 10.1200/JCO.18.01921
[7] 沙桐, 张伟. 氧化应激对潜在口腔恶性疾病作用的研究进展[J]. 口腔医学研究, 2021, 37(2): 109-112. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-KQYZ202102005.htm [8] SHANG Q, PENG J, ZHOU Y, et al. Association of human papillomavirus with oral lichen planus and oral leukoplakia: a meta-analysis[J]. J Evid Based Dent Pract, 2020, 20(4): 101485. doi: 10.1016/j.jebdp.2020.101485
[9] DE LA COUR C D, SPERLING C D, BELMONTE F, et al. Human papillomavirus prevalence in oral potentially malignant disorders: Systematic review and meta-analysis[J]. Oral Dis, 2021, 27(3): 431-438. doi: 10.1111/odi.13322
[10] GURIZZAN C, LORINI L, PADERNO A, et al. Immunotherapy for the prevention of high-risk oral disorders malignant transformation: the IMPEDE trial[J]. BMC Cancer, 2021, 21(1): 561. doi: 10.1186/s12885-021-08297-3
[11] FERLAY J, COLOMBET M, SOERJOMATARAM I, et al. Estimating the global cancer incidence and mortality in 2018: GLOBOCAN sources and methods[J]. Int J Cancer, 2019, 144(8): 1941-1953. doi: 10.1002/ijc.31937
[12] BRAY F, FERLAY J, SOERJOMATARAM I, et al. Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries[J]. CA: A Cancer J Clin, 2018, 68(6): 394-424. doi: 10.3322/caac.21492
[13] O′SULLIVAN B, HUANG S H, SU J, et al. Development and validation of a staging system for HPV-related oropharyngeal cancer by the International Collaboration on Oropharyngeal cancer Network for Staging (ICON-S): a multicentre cohort study[J]. Lancet Oncol, 2016, 17(4): 440-451. doi: 10.1016/S1470-2045(15)00560-4
[14] 张永侠, 刘明波, 黄辉, 等. 124例舌根鳞状细胞癌临床总结及预后分析[J]. 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2017, 31(24): 1867-1872. https://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-LCEH201724001.htm [15] STEIN A P, SAHA S, KRANINGER J L, et al. Prevalence of human papillomavirus in oropharyngeal cancer[J]. Cancer J, 2015, 21(3): 138-146. doi: 10.1097/PPO.0000000000000115
[16] 刘一戈, 张陈平. 口腔鳞状细胞癌与人乳头瘤病毒相关性在国人中的研究进展[C]//2020年全国口腔颌面-头颈肿瘤学术大会暨中华口腔医学会口腔颌面-头颈肿瘤专业委员会学术年会——创新超越、共赢未来论文集. 武汉, 2020: 374-375. [17] CHATURVEDI A K, GRAUBARD B I, BROUTIAN T, et al. NHANES 2009-2012 findings: association of sexual behaviors with higher prevalence of oral oncogenic human papillomavirus infections in US men[J]. Cancer Res, 2015, 75(12): 2468-2477. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-14-2843
[18] TABERNA M, MENA M, PAVÓN M A, et al. Human papillomavirus-related oropharyngeal cancer[J]. Ann Oncol, 2017, 28(10): 2386-2398. doi: 10.1093/annonc/mdx304
[19] CANCER GENOME ATLAS NETWORK. Comprehensive genomic characterization of head and neck squamous cell carcinomas[J]. Nature, 2015, 517(7536): 576-582. doi: 10.1038/nature14129
[20] TOMAIC V. Functional roles of E6 and E7 oncoproteins in HPV-induced malignancies at diverse anatomical sites[J]. Cancers, 2016, 8(10): 95. doi: 10.3390/cancers8100095
[21] JOHNSON D E, BURTNESS B, LEEMANS C R, et al. Head and neck squamous cell carcinoma[J]. Nat Rev Dis Primers, 2020, 6(1): 92. doi: 10.1038/s41572-020-00224-3
[22] PRIGGE E S, ARBYN M, VON KNEBEL DOEBERITZ M, et al. Diagnostic accuracy of p16INK4a immunohistochemistry in oropharyngeal squamous cell carcinomas: a systematic review and meta-analysis[J]. Int J Cancer, 2017, 140(5): 1186-1198. doi: 10.1002/ijc.30516
[23] BOSCOLO-RIZZO P, PAWLITA M, HOLZINGER D. From HPV-positive towards HPV-driven oropharyngeal squamous cell carcinomas[J]. Cancer Treat Rev, 2016, 42: 24-29. doi: 10.1016/j.ctrv.2015.10.009
[24] SCHACHE A G, LILOGLOU T, RISK J M, et al. Evaluation of human Papilloma virus diagnostic testing in oropharyngeal squamous cell carcinoma: sensitivity, specificity, and prognostic discrimination[J]. Clin Cancer Res, 2011, 17(19): 6262-6271. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-11-0388
[25] CHERNESKY M, JANG D, SCHWEIZER J, et al. HPV E6 oncoproteins and nucleic acids in neck lymph node fine needle aspirates and oral samples from patients with oropharyngeal squamous cell carcinoma[J]. Papillomavirus Res Amsterdam Neth, 2018, 6: 1-5. doi: 10.1016/j.pvr.2018.05.003
[26] NAUTA I H, RIETBERGEN M M, VAN BOKHOVEN A A J D, et al. Evaluation of the eighth TNM classification on p16-positive oropharyngeal squamous cell carcinomas in the Netherlands and the importance of additional HPV DNA testing[J]. Ann Oncol, 2018, 29(5): 1273-1279. doi: 10.1093/annonc/mdy060
[27] TORRES-IBARRA L, LORINCZ A T, WHEELER C M, et al. Adjunctive testing by cytology, p16/Ki-67 dual-stained cytology or HPV16/18 E6 oncoprotein for the management of HPV16/18 screen-positive women[J]. Int J Cancer, 2021, 148(9): 2264-2273. doi: 10.1002/ijc.33414
[28] 赵艺哗, 白玉萍, 毛美玲, 等. 口咽部人乳头状瘤病毒阳性鳞状细胞癌临床病理学观察[J]. 中华病理学杂志, 2019, 48(2): 127-131. doi: 10.3760/cma.j.issn.0529-5807.2019.02.010 [29] LEWIS J S, BEADLE B, BISHOP J A, et al. Human papillomavirus testing in head and neck carcinomas: guideline from the college of American pathologists[J]. Arch Pathol Lab Med, 2018, 142(5): 559-597. doi: 10.5858/arpa.2017-0286-CP
[30] FAKHRY C, LACCHETTI C, ROOPER L M, et al. Human papillomavirus testing in head and neck carcinomas: ASCO clinical practice guideline endorsement of the college of American pathologists guideline[J]. J Clin Oncol, 2018, 36(31): 3152-3161. doi: 10.1200/JCO.18.00684
[31] 段律芳, 杜辉, 肖爱民, 等. 宫颈癌早期诊断中细胞学p16 INK4a检测的价值[J]. 中华病理学杂志, 2020, 49(8): 812-815. doi: 10.3760/cma.j.cn112151-20191203-00779 [32] CASTELLSAGUÉX, ALEMANY L, QUER M, et al. HPV involvement in head and neck cancers: comprehensive assessment of biomarkers in 3680 patients[J]. J Natl Cancer Inst, 2016, 108(6): djv403. doi: 10.1093/jnci/djv403
[33] SCHACHE A G, LILOGLOU T, RISK J M, et al. Validation of a novel diagnostic standard in HPV-positive oropharyngeal squamous cell carcinoma[J]. Br J Cancer, 2013, 108(6): 1332-1339. doi: 10.1038/bjc.2013.63
[34] AUGUSTIN J, OUTH-GAUER S, MANDAVIT M, et al. Evaluation of the efficacy of the 4 tests (p16 immunochemistry, polymerase chain reaction, DNA, and RNA in situ hybridization) to evaluate a human papillomavirus infection in head and neck cancers: a cohort of 348 French squamous cell carcinomas[J]. Hum Pathol, 2018, 78: 63-71. doi: 10.1016/j.humpath.2018.04.006
[35] JORDAN R C, LINGEN M W, PEREZ-ORDONEZ B, et al. Validation of methods for oropharyngeal cancer HPV status determination in US cooperative group trials[J]. Am J Surg Pathol, 2012, 36(7): 945-954. doi: 10.1097/PAS.0b013e318253a2d1
[36] WANG H, ZHANG Y, BAI W, et al. Feasibility of immunohistochemical p16 staining in the diagnosis of human papillomavirus infection in patients with squamous cell carcinoma of the head and neck: a systematic review and meta-analysis[J]. Front Oncol, 2020, 10: 524928. doi: 10.3389/fonc.2020.524928
[37] LI Z, LIU F, CHENG S, et al. Prevalence of HPV infection among 28, 457 Chinese women in Yunnan Province, southwest China[J]. Sci Rep, 2016, 6: 21039. doi: 10.1038/srep21039
[38] ZHAO P Y, JIANG H C, LI Y, et al. Comparison of the cervista HPV HR test and luminex XMAP technology for the diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia[J]. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol, 2017, 214: 150-155. doi: 10.1016/j.ejogrb.2017.05.012
[39] KEUNG E S, SOUERS R J, BRIDGE J A, et al. Comparative performance of high-risk human papillomavirus RNA and DNA in situ hybridization on college of American pathologists proficiency tests[J]. Arch Pathol Lab Med, 2020, 144(3): 344-349. doi: 10.5858/arpa.2019-0093-CP
[40] RANDÉN-BRADY R, CARPÉN T, JOUHI L, et al. In situ hybridization for high-risk HPV E6/E7 mRNA is a superior method for detecting transcriptionally active HPV in oropharyngeal cancer[J]. Hum Pathol, 2019, 90: 97-105. doi: 10.1016/j.humpath.2019.05.006
[41] PAVER E C, CURRIE A M, GUPTA R, et al. Human Papilloma virus related squamous cell carcinomas of the head and neck: diagnosis, clinical implications and detection of HPV[J]. Pathology, 2020, 52(2): 179-191. doi: 10.1016/j.pathol.2019.10.008
[42] LANG KUHS K A, WOOD C B, WIGGLETON J, et al. Transcervical sonography and human papillomavirus 16 E6 antibodies are sensitive for the detection of oropharyngeal cancer[J]. Cancer, 2020, 126(11): 2658-2665. doi: 10.1002/cncr.32799
[43] LANG KUHS K A, KREIMER A R, TRIVEDI S, et al. Human papillomavirus 16 E6 antibodies are sensitive for human papillomavirus-driven oropharyngeal cancer and are associated with recurrence[J]. Cancer, 2017, 123(22): 4382-4390. doi: 10.1002/cncr.30966
[44] BLATT S, PABST A, ZIMMER S, et al. Clinical efficacy of an antibody-based detection system for human Papilloma virus infection in oral squamous cell carcinoma[J]. Clin Oral Investig, 2021, 25(5): 2837-2843. doi: 10.1007/s00784-020-03601-0
[45] BALACHANDRA S, KUSIN S B, LEE R, et al. Blood-based biomarkers of human papillomavirus-associated cancers: a systematic review and meta-analysis[J]. Cancer, 2021, 127(6): 850-864. doi: 10.1002/cncr.33221
[46] BUSSU F, RAGIN C, BOSCOLO-RIZZO P, et al. HPV as a marker for molecular characterization in head and neck oncology: Looking for a standardization of clinical use and of detection method(s) in clinical practice[J]. Head Neck, 2019, 41(4): 1104-1111. doi: 10.1002/hed.25591
-
期刊类型引用(6)
1. 李月轩，王晓东，陈玮玮，田晓阳，闫鑫，李士学，裴世深. 靶点射频热凝术联合臭氧消融术治疗椎间盘源性腰痛的临床研究. 中国中医骨伤科杂志. 2025(01): 65-68+73 . 
百度学术
2. 孙金国. 罗哌卡因复合右美托咪定局部浸润麻醉对后路腰椎椎间融合术术后患者的影响. 反射疗法与康复医学. 2024(16): 86-88 . 百度学术
3. 华海倩，李现林，张也. 通痹舒筋丸联合腰腹肌功能锻炼护理对椎间盘源性腰痛患者的影响. 护理实践与研究. 2022(18): 2685-2688 . 百度学术
4. 孙晓飞，张子甲，田军涛. 低温等离子射频联合硬膜外阻滞治疗腰椎间盘突出症疗效观察. 医药论坛杂志. 2021(02): 94-97 . 百度学术
5. 贺红庆，张士铭，朱丽霞. 强离子隙对扩张型心肌病患者发生心力衰竭的预测效果. 医药论坛杂志. 2021(05): 107-110 . 百度学术
6. 刘姣，谭波涛，虞乐华. 腰椎间盘突出症的治疗研究进展. 保健医学研究与实践. 2020(03): 82-86 . 百度学术
其他类型引用(2)
计量
- 文章访问数: 366
- HTML全文浏览量: 499
- PDF下载量: 43
- 被引次数: 8
下载:
苏公网安备 32100302010246号
