Progress in detection of oropharyngeal human papillomavirus infection
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摘要: 人乳头瘤病毒(HPV)是一种仅感染人类的双链DNA病毒，口咽部HPV感染可引起口腔潜在恶性疾病与头颈部鳞状细胞癌等不良后果，口咽部HPV感染的检测是早期诊断与治疗的关键。近年来，以核酸检测与免疫组化(IHC)作为检测HPV的主流方法，其他多种替代方法也得到了迅速发展。本文综述了口咽部HPV感染的不良后果与检测方法的研究进展，以期为临床应用提供参考依据。Abstract:Human papillomavirus (HPV) is a double-stranded DNA virus that only infects humans. Oropharyngeal HPV infection can cause potential oral malignant diseases as well as head and neck squamous cell carcinoma and other adverse consequences. Detection of oropharyngeal HPV infection is the key to early diagnosis and treatment. In recent years, nucleic acid detection and immunohistochemistry (IHC) are the mainstream method for the HPV detection, and many alternative methods have also been rapidly developed. This article reviewed the research progress of adverse effects and detection methods of oropharyngeal HPV infection, so as to provide reference for clinical application.
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中国心血管疾病患病率及病死率仍处于上升阶段，其中冠心病(CAD)是临床最常见的心血管疾病，主要分型有急性心肌梗死(AMI)和心绞痛。AMI是因冠状动脉严重狭窄或闭塞导致心肌不可逆性缺血的CAD严重类型[1]; 而心绞痛是由于暂时性心肌缺血引起的以胸痛为主要特征的临床综合征，是CAD最常见的表现。在疾病预防、控制危险因素层面，降低CAD发生风险尤其是AMI发生率尤为重要，而在众多危险因素中，饮食是可防可控的关键危险因素[2]。以往涉及饮食方面的研究，主要集中于单一营养素或食物对疾病的影响，并未对膳食结构影响进行评价。本研究根据膳食结构调查，并引入替代健康饮食指数-2010(AHEI-2010)分层，分析CAD中AMI与常见心绞痛的膳食差异，以明确AMI患者膳食特点和危险因素，现报告如下。
1. 资料与方法
1.1 一般资料
选取本院心脏科2018年1—12月收治的心绞痛或AMI的72例患者为研究对象，其中男42例，女30例，年龄33~87岁，平均年龄(63.4±10.6)岁。根据是否存在心肌损伤分组: ①心肌梗死组33例，存在心电图动态演变及血清心肌标志物阳性改变者; ②心绞痛组39例，以单纯胸痛、胸闷为首发症状且经心电图明确心绞痛诊断，但心肌标志物、心脏超声等检查除外心肌损伤、心脏结构异常者，并在住院期间进行饮食调查分析。纳入标准: ①首次诊断为心绞痛或AMI而无严重并发症者; ②可经口进食，并能掌握膳食调查内容者; ③表达清楚、沟通无障碍者。排除标准: ①伴有严重肝、肾疾病、脑梗死，长期肠内、肠外营养不能经口进食，需要特殊膳食者; ② AMI存在严重心律失常、心力衰竭、猝死者; ③既往诊断CAD患者; ④存在其他原发或继发性心脏病者，如心脏瓣膜病变、肥厚性心肌病、甲状腺功能亢进、严重贫血等; ⑤不能理解膳食调查内容、语言表述障碍者。
1.2 方法
在研究对象知情同意的前提下，采用面对面问卷调查方法，收集研究对象的一般资料，包括年龄、身高、体质量、半定量食物摄入量调查结果、AHEI-2010评分等。
同一营养师采用一对一、面对面形式，采用半定量食物频率调查问卷[3]收集所有研究对象过去1年的饮食习惯，包括食物种类、每类食物的摄入频率(次/d、次/周、次/月、不吃)以及每次的摄入量(g/mL), 计算每类食物的日平均摄入量。食物种类主要包括谷物、精制全谷类、薯类、蔬菜、水果、果汁、饮料、坚果类、豆类、豆制品、肉类、肉类制品、蛋类、牛奶、奶制品、动物油、植物油、海产品、盐及酒精20类，以及北京当地居民常吃的腌制食品、小吃、零食、调味品。食物日平均摄入量(g/d)=食用频率×每次摄入量/周期所含天数。
1.3 观察指标
通过上述膳食摄入量调查各类食物的食用分量，根据理想热量摄入水平所推荐的各类食物每日所需要的标准分量，采用AHEI-2010系统计分，分别得到蔬菜、水果、全谷类、含糖饮料和果汁、坚果及豆类、红肉及其制品、反式脂肪酸、长链脂肪酸、多不饱和脂肪酸(PUFA)、盐、酒精，共计11项单类评分，其中根据食物成分表换算反式脂肪酸、长链脂肪酸、PUFA、盐类的摄入。合计11个单项，得出AHEI-2010总分为0~110分，并根据AHEI-2010总分划为4组: 良好膳食(81~110分)、需要改善膳食(51~80分)、不良膳食(31~50分)、较差膳食(≤30分)[4-5]。
1.4 统计学分析
数据录入营康系统软件version 1.1(营康公司，中国)进行数据处理，并分析食物摄入量和AHEI-2010评分。采用SPSS 19.0软件对2组资料进行统计学分析，计数资料以[n(%)]表示，计量资料以(x±s)表示，计数资料采用χ2检验，计量资料采用独立样本t检验或方差分析进行比较。以患者是否发生AMI作为因变量，对AHEI中11项单类食物进行多因素二元Logistic回归分析，进行AMI风险预测评估。所有统计方法均按检验水准>α=0.05为标准，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2. 结果
2.1 一般资料
2组患者年龄、体质量指数(BMI)、体力活动情况比较，差异无统计学意义(P>0.05), 见表 1。
表 1 2组冠心病患者基本情况比较(x±s)[n(%)]组别 n 年龄/岁 体质量指数/(kg/m2) 体力活动 卧床 轻体力 中体力 重体力 心绞痛组 39 64.5±9.5 24.8±3.3 9(23.1) 6(15.4) 13(33.3) 11(28.2) 心肌梗死组 33 62.1±12.1 26.4±3.1 5(15.2) 11(33.3) 7(21.2) 10(30.3) 2.2 AMI、心绞痛患者饮食模式分析
心绞痛组AHEI-2010评分总分为(52.0±3.8)分，高于心肌梗死组的(51.0±3.0)分，但差异无统计学意义(t=0.323, P=0.637)。根据膳食结构优劣程度对AHEI-2010评分进行分层计数，并对良好膳食、需要改善膳食、不良膳食、较差膳食结构进行比较, 2组患者膳食结构构成比比较，差异有统计学意义(χ2=10.254, P=0.017), 见表 2。进一步对4种膳食结构进行两两比较，心肌梗死组不良膳食结构的患者占比高于心绞痛组，差异有统计学意义(χ2=7.005, P=0.008); 心肌梗死组较差膳食结构的患者占比高于心绞痛组，差异有统计学意义(χ2=4.916, P=0.027)。见表 2。
表 2 2组冠心病患者膳食摄入的AHEI-2010评分及分组比较(x±s)[n(%)]组别 n AHEI-2010总分/分 膳食结构分组 良好膳食 需要改善膳食 不良膳食 较差膳食 心绞痛组 39 52.0±13.8 0 26(66.7) 11(28.2) 2(5.1) 心肌梗死组 33 51.0±13.0 1(3.0) 10(30.3)* 17(51.5)* 5(15.2)* AHEI-2010: 替代健康饮食指数-2010。与心绞痛组比较, *P < 0.05。 2.3 心肌梗死患病风险的多因素Logistic回归分析
2组全谷类(P=0.033, OR=0.744, 95%CI为0.567~0.976)、坚果和豆类(P=0.035, OR=0.705, 95%CI为0.510~0.975)、钠摄入量(P=0.008, OR=1.416, 95%CI为1.096~1.831)比较，差异有统计学意义。见表 3。合理增加全谷类、坚果及豆类摄入量可降低AMI的发生率，而钠摄入量过多增加AMI发生风险。
表 3 心肌梗死患病风险的多因素分析变量 回归系数 标准误 Wald χ2值 P OR 蔬菜 0.013 0.128 0.010 0.919 1.013 水果 -0.152 0.126 1.466 0.226 0.859 全谷类 -0.295 0.138 4.550 0.033 0.744 坚果及豆类 -0.349 0.165 4.464 0.035 0.705 酒精 -0.222 0.140 2.511 0.113 0.801 反式脂肪酸 0.089 0.241 0.137 0.712 1.093 长链脂肪酸 -0.245 0.248 1.934 0.164 0.708 PUFA 0.643 0.366 3.084 0.079 1.903 饮料 -0.080 0.170 0.220 0.639 0.942 红肉 -0.041 0.167 0.059 0.808 0.960 钠 0.348 0.131 7.058 0.008 1.416 常数项 8.067 6.172 1.708 0.191 3 186.100 PUFA: 多不饱和脂肪酸。 3. 讨论
饮食对疾病的预防和治疗至关重要，单一营养素可作为致病因素。由于人类饮食的多样性和复杂性，慢性病的风险与整体饮食的关系更密切，如心血管疾病[6]、糖尿病[7]和肥胖[8]、全身炎症免疫[9]等。简单的食物评价不能够有效地分析膳食的合理性[10-11]，因此产生出一系列综合评估方法以分析膳食结构和模式。通过这些方法，既可以探讨食物组之间的相互作用和协同作用，也能探索饮食结构与慢性疾病之间的关系，故饮食模式评估对于慢性疾病的防控更加重要。
既往疾病与食物的研究根据各种食物中综合营养物质与健康结果之间关系，分析饮食质量与慢性疾病风险之间的关系。这些饮食模式分析体系包括高血压控制饮食(DASH)[12]、预防心脑血管疾病的地中海饮食[13]、健康饮食指数(HEI)[14]和替代健康饮食指数(AHEI)[7]等，上述饮食模式分析体系已经成为分析慢性疾病患者饮食情况的有效工具，一方面可评价患者饮食模式，另一方面可提出膳食改进的方案。在众多膳食评价方法中, AHEI较其他膳食评价方法更能反映慢性病与饮食之间的关系，且其评价内容与居民膳食指南更为贴近。然而AHEI是根据美国人的饮食指南制订，旨在降低慢性疾病的风险, 2012年Nutrion发布的AHEI-2010是该指数的更新版本[4]，包含了降低慢性病风险的额外饮食建议，如食用坚果及豆类，避免含糖饮料。AHEI-2010是以食物金字塔及膳食指南为依据设计，包含了蔬菜、水果、坚果等评分，摄入量越接近推荐摄入分量则得分越高; 该评分特别设计了慢性病相关的营养素摄入量，如PUFA、长链脂肪酸、反式脂肪酸、盐类和含糖饮料等，设定了上限和下限，根据其具体摄入情况进行评分，衡量标准为AHEI-2010综合评分＞80分即为健康饮食模式。
西方人群相关研究[6, 15-16]已经证实这些饮食质量指标与心血管疾病风险相关, 且现有研究[15-17]表明，健康的饮食模式可以降低心血管疾病的风险，但关于亚洲人群的研究很少。NEELAKANTAN N等[18]研究分析了751例东亚人群，发现AHEI-2010评分与AMI具有一定相关性。随着AHEI-2010评分升高, AMI发生风险降低; 且AHEI-2010评分与致死性AMI发生率也呈负相关性。但本研究发现，AHEI-2010评分本身对于CAD患者发生心脏病变的程度并无显著差异，但AMI患者AHEI-2010评分较心绞痛更低，可能与纳入患者量较少有关。因此，进一步将AHEI-2010评分根据膳食结构优劣程度进行分层划分后再比较，发现2组患者中仅1例达到良好膳食标准，且心肌梗死组不良膳食和较差膳食的构成比显著高于心绞痛组。另一方面由于患者个体不同，不同患者每日进食食物的量受其身高、体质量、活动量等因素影响。本研究针对11项膳食单项进行回归分析发现，相较心肌梗死组，心绞痛组患者全谷物(男性90 g/d, 女性75 g/d)、坚果及豆类(28.35 g/d)、盐(女性≤1 112 mg/d, 男性≤1 612 mg/d)的摄入量更接近于AHEI-2010的推荐量，控制上述3项，对预防心肌梗死事件的发生具有一定作用。YU D X等[19]对上海普通人群心血管疾病与饮食相关风险进行评估，结果表明AHEI-2010评分能够预测心血管病病死率。在单项膳食分组中，遵守推荐量的蔬菜、水果、坚果及豆类、鱼、鸡蛋摄入，可显著降低CAD病死率, AHEI-2010评分与普通人群的心血管疾病病死率呈负相关。本研究部分结论与上述研究一致，但蔬菜、水果、脂肪酸的摄入量对心肌梗死发生风险的影响无显著差异，可能是由于选取的对照组为同样具有冠状动脉病变的心绞痛患者，此两类患者在蔬菜、水果的饮食上有一定的相似性，而北京地区鱼类等海产品摄入量不足，同时与大部分患者长期口服降脂药物有关[20]。
综上所述，营养治疗在CAD患者管理中具有重要意义，坚持特定合理的膳食模式，可能有利于减少冠心病患者AMI的发生。
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